[发明专利]质粒

权利要求书

1.一种缺乏hypC2核苷酸序列或其同源物的接合质粒。

2.权利要求1的质粒，其中所述质粒缺乏SEQ ID NO: 1或与SEQ ID NO: 1具有至少70%同一性的核苷酸序列。

3.权利要求1或2的质粒，其中所述质粒包含IncX质粒的OriT，任选地其中所述质粒为IncX质粒。

4.任何前述权利要求的质粒，其中所述质粒为肠杆菌科质粒，任选地其中所述质粒为大肠杆菌、克雷伯氏菌属、沙门氏菌属、欧文氏菌属、志贺氏菌属、泛菌属、变形菌属或柠檬酸杆菌属质粒。

5.任何前述权利要求的质粒，其中所述质粒能够寄宿于肠杆菌科细胞中，任选地其中所述质粒能够寄宿于大肠杆菌、克雷伯氏菌属、沙门氏菌属、欧文氏菌属、志贺氏菌属、泛菌属、变形菌属或柠檬酸杆菌属细胞。

6.任何前述权利要求的质粒，其中所述质粒能够接合转移至肠杆菌科细胞中，任选地其中所述质粒能够接合转移至大肠杆菌、克雷伯氏菌属、沙门氏菌属、欧文氏菌属、志贺氏菌属、泛菌属、变形菌属或柠檬酸杆菌属细胞中。

7.一种包含接合质粒的细菌细胞，其中所述细胞不包含hypC2蛋白或其同源物。

8.权利要求7的细胞，其中所述蛋白包含SEQ ID NO: 2的氨基酸序列或与SEQ ID NO:2具有至少70%同一性的氨基酸序列。

9.权利要求7或8的细胞，其中所述细胞为肠杆菌科细胞，任选地其中所述细胞为大肠杆菌、克雷伯氏菌属、沙门氏菌属、欧文氏菌属、志贺氏菌属、泛菌属、变形菌属或柠檬酸杆菌属细胞。

10.任何前述权利要求的质粒或细胞，其中所述质粒包含或编码抗菌剂。

11.任何前述权利要求的质粒或细胞，其中所述质粒编码引导RNA或crRNA，任选地其中所述引导RNA或crRNA能够与靶细胞的前间隔序列杂交。

12.权利要求11的质粒或细胞，其中所述靶细胞选自大肠杆菌、克雷伯氏菌属、沙门氏菌属、欧文氏菌属、志贺氏菌属、泛菌属、变形菌属或柠檬酸杆菌属细胞。

13.权利要求1-6和10-12中任何一项的质粒在制造组合物中的用途，所述组合物包含含有所述质粒的第一细胞群，用于在第一和第二细胞彼此接触且为细菌细胞时，提高质粒从第一细胞到第二群体的细胞的接合转移的频率。

14.一种将感兴趣的核酸序列(NSI)从供体细胞转移至受体细胞中的方法，其中NSI包含在质粒中并且所述质粒包含在所述供体细胞中，所述方法包括组合所述细胞以允许将所述质粒从所述供体细胞接合转移至所述受体细胞中，其中所述质粒为权利要求1-6和10-12中任何一项的质粒。

15.权利要求14的方法，其中所述供体细胞选自大肠杆菌、克雷伯氏菌属、沙门氏菌属、欧文氏菌属、志贺氏菌属、泛菌属、变形菌属或柠檬酸杆菌属细胞和/或所述受体细胞选自大肠杆菌、克雷伯氏菌属、沙门氏菌属、欧文氏菌属、志贺氏菌属、泛菌属、变形菌属或柠檬酸杆菌属细胞。

16.权利要求14或15的方法，其中所述受体细胞为肠杆菌科细胞和/或所述供体细胞为大肠杆菌细胞。

17.权利要求14-16中任何一项的方法，其中所述NSI为或编码抗菌剂，任选地其中所述抗菌剂对所述受体细胞具有毒性。