[发明专利]标准型类器官的生产方法在审
申请号: | 202080061308.0 | 申请日: | 2020-06-25 |
公开(公告)号: | CN114423858A | 公开(公告)日: | 2022-04-29 |
发明(设计)人: | 郑锡;梁智勋;丁庸勋;崔东熙 | 申请(专利权)人: | 株式会社下一代生物 |
主分类号: | C12N5/09 | 分类号: | C12N5/09;C12N5/071;C12M3/00 |
代理公司: | 北京银龙知识产权代理有限公司 11243 | 代理人: | 钟海胜;宋琴芝 |
地址: | 韩国首*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 标准型 器官 生产 方法 | ||
1.一种生产类器官的方法,所述方法包括:
通过在3D细胞培养板中培养细胞形成类器官,
其中,在所述类器官的形成中,所述细胞培养板包含0至2体积%的基于胞外基质的水凝胶,以及
其中,所述3D细胞培养板包括:
孔板,所述孔板包括多个主孔和多个子孔,所述多个子孔形成在主孔的下部以注入细胞培养液并且包括在其底表面上的凹入部;和支持所述孔板的用于大容量和高速高内涵筛选(HCS)的连接件,并且
用于高内涵筛选(HCS)的连接件包括配备有固定装置以与所述孔板的下端连接并且从所述孔板的下端分离的底座以及位于所述孔板的上部以连接到所述底座的盖,
所述主孔具有形成为在预定位置逐渐变细的台阶,所述台阶相对于主孔的壁具有10°至60°的倾斜角(θ)。
2.权利要求1所述的方法,其中,所述基于胞外基质的水凝胶是基底胶。
3.权利要求1所述的方法,其中,所述细胞是正常细胞或癌细胞,并且
细胞培养周期为1至14天。
4.权利要求1所述的方法,其中,所述类器官的大小是直径为300μm至500μm。
5.权利要求1所述的方法,其中,所述子孔具有形成为朝向所述凹入部逐渐变细的倾斜表面。
6.权利要求1所述的方法,其中,所述子孔具有形成为朝向所述凹入部逐渐变细的倾斜表面,
所述子孔的上端直径为3.0mm至4.5mm,
所述凹入部的上端直径为0.45mm至1.5mm,
所述子孔和所述凹入部之间的倾斜表面(θ2)为40°至50°,并且
所述子孔的直径与所述凹入部的直径的长度比为1:0.1至1:0.5。
7.权利要求1所述的方法,其中,所述主孔的个体体积为100μl至300μl,
所述凹入部的个体体积为20μl至50μl,主孔与凹入部的个体体积比平均为1:0.1至1:0.5。
8.权利要求1所述的方法,其中,所述主孔包括所述台阶和所述子孔之间的空间部,
所述空间部的高度(ah)平均为2.0mm至3.0mm,
所述子孔的高度(bh)平均为1.0mm到2.0mm,并且
所述空间部与所述子孔的高度比(ah:bh)为1:0.3至1:1。
9.权利要求1所述的方法,其中,所述细胞以100至300个细胞/孔接种在所述细胞培养板的所述子孔中。
10.根据权利要求1至9中任一项所述的方法生产的类器官,其直径为300μm至500μm。
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