[发明专利]标准型类器官的生产方法

说明书

本发明提供了标准型类器官的生产方法。

技术领域

本发明涉及生产标准型类器官的方法。更具体地，本发明涉及生产具有均匀大小的类器官的方法。

背景技术

类器官也称为“器官类似物”或“类器官”，是通过3D培养方法将从干细胞或器官来源细胞中分离出来的细胞重新聚集和重组而产生的器官特异性细胞聚集体。类器官包括模型器官的特异性细胞，再现器官的特异性功能，并且可以以类似于实际器官的形式空间上组织。据报道，患者来源的肿瘤类器官代表患者癌细胞和组织的特征，因为它们可以再现患者的癌症组织的遗传变异特征。

类器官可用于细胞治疗、生物组织工程、新药开发、毒理学和精准医学等领域。需要大量可比较的定量类器官及其分析方法来提高类器官的利用率。然而，迄今为止还没有定量培养类器官的方法。其原因在于，作为最重要的类器官生长元素的基底胶在底部固化成圆顶状后，类器官就会在其中生长，从而使类器官单独生长。

此外，由于在基底胶中如此生长的类器官可以在3D载体中重叠的同时生长，因此限制是明确的。

此外，最近，已经开发出结合更稳定和生理患者来源的类器官的高通量筛选技术，用于早期药物发现程序和毒性筛查。

韩国专利第10-1756901号(专利文献1)公开了一种能够培养3D组织细胞的细胞培养芯片。在专利文献1的细胞培养芯片中，第1培养部、第2培养部和第3培养部在各层中形成，并且能够在各层确认细胞增殖的进展程度。但是，专利文献1的细胞培养芯片存在不能以高收率获得类器官的问题。

此外，存在在进行细胞培养的过程中更换培养液的移液作业的情况，在能够进行3D细胞培养的Corning球状体微孔板的情况下，细胞培养中的球状体或类器官会受到影响，使得因为存在在移液作业的过程中球状体或类器官会被吸起或位置发生变化的情况，而存在不利于细胞培养环境的问题。

因此，本发明人在不使用基于胞外基质的水凝胶(例如，基质胶)或最小化基于胞外基质的水凝胶的使用的情况下，对大小均一的标准型类器官进行了持续研究，从而完成了本发明。

[相关技术文献]

[专利文献]

1.韩国专利第10-1756901号

发明内容

技术问题

本发明的一个目的是提供生产标准型类器官的方法。

本发明的另一目的是提供一种由上述方法制备的标准型类器官，其大小均一且各类器官的功能相似。

然而，本发明要解决的技术问题不限于上述问题，本领域技术人员可以通过以下描述清楚地理解未提及的其他问题。

技术方案

为实现该目的，本发明是

一种生产类器官的方法，所述方法包括：

通过在3D细胞培养板中培养细胞形成类器官，

其中，在所述类器官的形成中，所述细胞培养板包含0至2体积％的基于胞外基质的水凝胶，以及

其中，3D细胞培养板包括：

孔板，所述孔板包括多个主孔和多个子孔(sub well)，所述多个子孔形成在主孔的下部以注入细胞培养液并且包括在其底表面上的凹入部；和支持所述孔板的用于大容量和高速高内涵筛选(HCS)的连接件，并且

用于高内涵筛选(HCS)的连接件包括配备有固定装置以与所述孔板的下端连接并且从所述孔板的下端分离的底座以及位于所述孔板的上部以连接到所述底座的盖，所述主孔具有形成为在预定位置逐渐变细的台阶，所述台阶相对于主孔的壁具有10°至60°的倾斜角(θ)。