[发明专利]小白蛋白阳性神经细胞的制造方法、细胞及分化诱导剂

权利要求书

1.一种小白蛋白阳性神经细胞的制造方法，包含：

诱导表达工序，在细胞内诱导Ascl1基因、Dlx2基因和MEF2C基因的表达，以及

分化工序，培养所述诱导表达后的细胞而由所述细胞分化小白蛋白阳性神经细胞。

2.根据权利要求1所述的小白蛋白阳性神经细胞的制造方法，其中，所述诱导表达工序包含将Ascl1基因和Dlx2基因以能表达的方式导入到所述细胞内的基因导入工序。

3.根据权利要求2所述的小白蛋白阳性神经细胞的制造方法，其中，所述诱导表达工序进一步包含以能表达的方式导入MEF2C基因的基因导入工序。

4.根据权利要求1～3中任一项所述的制造方法，其中，所述Ascl1基因、Dlx2基因和MEF2C基因为四环素调控性、即Tet-ON。

5.根据权利要求1～4中任一项所述的制造方法，其中，所述诱导表达工序包含同时诱导表达选自微小RNA-9/9^*即miRNA-9/9^*、微小RNA-124即miRNA-124和BclxL基因中的至少1种的工序。

6.根据权利要求5所述的制造方法，其中，所述诱导表达工序包含以能表达的方式导入选自微小RNA-9/9^*即miRNA-9/9^*、微小RNA-124即miRNA-124和BclxL基因中的至少1种的基因导入工序。

7.根据权利要求5或6所述的制造方法，其中，所述微小RNA-9/9^*即miRNA-9/9^*、微小RNA-124即miRNA-124和BclxL基因为四环素调控性、即Tet-ON。

8.根据权利要求1～7中任一项所述的制造方法，其中，所述细胞为成纤维细胞或多能干细胞。

9.根据权利要求1～8中任一项所述的制造方法，其中，所述诱导表达工序进行1～5天。

10.根据权利要求1～9中任一项所述的制造方法，其中，所述分化工序进行10天以上。

11.一种细胞，其以能表达的方式导入有Ascl1基因、Dlx2基因和MEF2C基因。

12.根据权利要求11所述的细胞，其中，所述Ascl1基因、Dlx2基因和MEF2C基因为四环素调控性、即Tet-ON。

13.根据权利要求11或12所述的细胞，其中，进一步以能表达的方式导入有选自微小RNA-9/9^*即miRNA-9/9^*、微小RNA-124即miRNA-124和BclxL基因中的至少1种。

14.根据权利要求13所述的细胞，其中，所述微小RNA-9/9^*即miRNA-9/9^*、微小RNA-124即miRNA-124和BclxL基因为四环素调控性、即Tet-ON。

15.根据权利要求11～14中任一项所述的细胞，其中，所述细胞为成纤维细胞或多能干细胞。

16.一种分化诱导剂，其含有Ascl1基因、Dlx2基因和MEF2C基因、或者它们的基因产物作为有效成分，用于将细胞分化诱导为小白蛋白阳性神经细胞。

17.根据权利要求16所述的分化诱导剂，其中，所述Ascl1基因、Dlx2基因和MEF2C基因为四环素调控性、即Tet-ON。