[发明专利]ROR1特异性嵌合抗原受体及其治疗应用

说明书

本发明涉及ROR1特异性嵌合抗原受体及其治疗应用。所述CAR包括信号肽、ROR1抗原结合结构域、铰链、跨膜结构域、共刺激结构域和细胞内信号结构域，上述CAR修饰的免疫细胞适合用于治疗恶性肿瘤，如癌症、慢性淋巴细胞白血病(CLL)和急性淋巴细胞白血病(ALL)。

技术领域

本发明涉及生物医学或生物制药技术领域，具体涉及一种ROR1特异性嵌合抗原受体及其治疗应用。

背景技术

近年一种称为过继细胞转移(adoptive cell transfer,ACT)的新兴免疫疗法快速发展，该疗法利用免疫细胞来消灭癌症，其中一些方法涉及获取天然免疫细胞并直接扩大其数量，而其他方法涉及对免疫细胞进行基因工程以增强其抗癌能力。

就癌症而言，被称为杀伤性T细胞的免疫细胞由于能够与癌细胞表面的标记物(即抗原)结合，对癌症治疗特别有效，细胞免疫疗法即以不同方式利用这种天然能力，包括肿瘤浸润淋巴细胞(tumor-infiltrating lymphocyte,TIL)疗法、工程T细胞受体(engineered T cell receptor,TCR)疗法、嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor,CAR)T细胞疗法、自然杀手(NK)细胞疗法等。尽管有多种类型的ACT疗法，迄今为止在临床开发中进展最大的是CAR-T细胞疗法。

越来越多的CAR-T细胞疗法被开发以应用于临床研究，尽管这些疗法之间存在很多差异，但它们都有相似的组成部分。细胞表面的CAR由合成抗体的片段或结构域组成，该结构域会影响受体识别或结合肿瘤细胞抗原的能力；受体依赖来自细胞内部的刺激信号完成其工作，因此，每个CAR-T细胞都有细胞内信号结构域和“共刺激”结构域，从表面受体向细胞发出信号，使用不同结构域会影响细胞的整体功能。随着CAR-T细胞胞内工程改造技术的进步，T细胞在患者体内的扩增能力和存活时间逐步提高。

ROR1是孤儿受体家族成员之一，在物种间高度保守，参与控制细胞生长和上皮间质转化等多种信号通路(Shabani M,Naseri J,Shokri F.Receptor tyrosine kinase-like orphan receptor 1:a novel target for cancer immunotherapy.Expert OpinTher Targets.2015Jul；19(7):941-55)。Wnt5a是ROR1的配体之一(Fukuda T,Chen L,EndoT,Tang L,Lu D,Castro JE,et al.,Antisera induced by infusions of autologousAd-CD154-leukemia B cells identify ROR1 as an oncofetal antigen and receptorfor Wnt5a.Proc Natl Acad Sci U S A.2008；105(8):3047–52)。

ROR1被认为是多种恶性肿瘤的生存影响因子，包括慢性淋巴细胞白血病(CLL)、乳腺癌、肺腺癌、卵巢癌、胰腺癌和胶质母细胞瘤(Hojjat-Farsangi M,Moshfegh A,Daneshmanesh AH,Khan AS,Mikaelsson E,Osterborg A,et al.,The receptor tyrosinekinase ROR1—an oncofetal antigen for targeted cancer therapy.Semin CancerBiol.2014；29:21–31)。