[发明专利]遗传修饰的肠病毒载体

说明书

提供了具有修饰的肠病毒基因组(例如，脊髓灰质炎病毒、柯萨奇病毒或艾柯病毒基因组)的复制型溶瘤病毒载体，其中所述修饰的肠病毒基因组具有与肠病毒基因组的非翻译区(UTR)可操作地连接的一种或多种miRNA靶序列的一个或多个拷贝。还提供了用于治疗癌症(包括例如肺癌)的组合物和方法。

相关申请的交叉引用

本专利申请根据35U.S.C.§119(e)要求2019年8月5日提交的美国临时专利申请号62/883,055的权益，该申请通过引用以全文并入本文用于所有目的。

发明领域

本发明通常涉及在正常组织中具有降低的毒性的遗传修饰的溶瘤肠病毒载体及其用途。

关于序列表、表或计算机程序

序列表的正式副本作为ASCII格式化文本文件通过EFS-Web与说明书同时提交，文件名为“VIRO412_ST25.txt”，创建日期为2019年8月4日，大小为2.20KB。通过EFS-Web提交的序列表是说明书的一部分，并通过引用将其全文并入本文。

背景

癌症包括多种疾病，其涉及扩散或侵入身体的其它组织的细胞的不受控制的或异常的生长，最初导致身体功能的变化(取决于癌症的类型)，并且最终导致死亡。每年发生约1410万新的癌症病例(不包括黑色素瘤以外的皮肤癌)。

在大部分西方世界中，肺癌分别是男性和女性的第三和第二最常见的癌症，并且是两种性别的癌症相关死亡的主要原因。非小细胞肺癌(“NSCLC”)构成约85％的肺癌病例。其中，腺癌是最常见的肺癌类型，占所有肺癌的几乎一半。遗传突变在NSCLC的发展中起着至关重要的作用。良好鉴定的致癌驱动突变包括表皮生长因子受体(“EGFR”)和Kirsten大鼠肉瘤病毒致癌基因同系物(“KRAS”)，其分别出现在约15％和约30％的肺腺癌中。尽管EGFR突变可以是临床靶向的，但是KRAS突变目前非常难以治疗并且与不良预后相关。小细胞肺癌(“SCLC”)占所有肺癌的约15％。60％至90％的SCLC病例的特征在于编码肿瘤蛋白p53和/或成视网膜细胞瘤蛋白(Rb)的基因中的突变。对于SCLC也没有靶向疗法。

已经开发了许多治疗癌症的疗法，包括例如放射疗法，化学疗法，癌症的外科手术切除，或这些疗法的一些组合。已经显示出进展的一个新的疗法领域是“靶向疗法”，其中组合物和方法用于特异性靶向和杀死肿瘤细胞(与“正常”细胞相反)。

靶向疗法的一个实例是溶瘤病毒。简言之，溶瘤病毒被定义为能够通过其自身复制过程诱导肿瘤细胞裂解，并且优选地，不会对正常组织造成实质性伤害的病毒。溶瘤病毒相对于其它癌症疗法的最大优点是候选病毒可经遗传操作以增加其对抗特定癌症类型的效力。在2015年，FDA批准第一例遗传修饰的单纯疱疹病毒1(Talimogene laherparepvec或“T-VEC”)用于治疗黑色素瘤。在过去的几十年中，几种不同的溶瘤病毒，包括逆转录病毒，痘苗病毒，腺病毒，麻疹病毒和新城疫病毒，都已经在用于癌症治疗的临床试验中测试。然而，总的抗癌功效和特异性仍然较低，并且仍然没有FDA批准的肺癌病毒疗法。

因此，仍然需要改进的用于癌症例如肺癌的靶向治疗，其裂解和破坏转化的细胞，同时不会对健康的、未转化的细胞造成实质性伤害，并且其克服与现有技术相关的一个或多个缺点。

在背景部分中讨论的所有主题不一定是现有技术，并且不应该仅仅因为在背景部分中讨论而被认为是现有技术。沿着这些路线，对在背景部分中讨论的现有技术中或与这种主题相关的问题的任何认识不应被视为现有技术，除非明确地载明为现有技术。相反，在背景部分中对任何主题的讨论应当被视为发明人对特定问题的方法的一部分，这就其本身而言也可以是具备创造性的。

发明内容

简而言之，本发明涉及修饰肠病毒基因组(例如柯萨奇病毒如B3)的基于微RNA(“miRNA”)的方法，以便进一步增强其肿瘤特异性。