[发明专利]可在无血清培养基中悬浮培养的新型Vero细胞系及其制备方法以及使用新型细胞系制备疫苗用病毒的方法在审
申请号: | 202080082143.5 | 申请日: | 2020-11-25 |
公开(公告)号: | CN115768872A | 公开(公告)日: | 2023-03-07 |
发明(设计)人: | 郭浚硕;金恩顺;金勋;徐基元;李建世;李受陈;洪承惠 | 申请(专利权)人: | SK生物科学株式会社 |
主分类号: | C12N5/071 | 分类号: | C12N5/071;C07K14/005;A61K39/12 |
代理公司: | 北京润平知识产权代理有限公司 11283 | 代理人: | 刘兵 |
地址: | 韩国*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 血清 培养基 悬浮 培养 新型 vero 细胞系 及其 制备 方法 以及 使用 疫苗 病毒 | ||
1.一种Vero细胞系sVERO 7C2(保藏编号:KCLRF-BP-00470)。
2.根据权利要求1所述的Vero细胞系,其特征在于,所述细胞系来源于WHO分发的Vero细胞,所述细胞系不需要血清来用于细胞生长,且无需附着用载体,可以悬浮培养。
3.根据权利要求1所述的Vero细胞系,其特征在于,所述细胞系增殖病毒。
4.一种使用权利要求1所述的细胞系制备疫苗用病毒的方法。
5.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,所述病毒选自黄热病毒、寨卡病毒、轮状病毒、登革热病毒、流感病毒、麻疹病毒、日本脑炎病毒、腮腺炎病毒、风疹病毒、脊髓灰质炎病毒、HSV-1、HSV-2、狂犬病病毒、RS病毒、呼肠孤病毒3型、细小病毒、柯萨奇病毒、腺病毒1至47型、拉沙病毒、大疱性口炎病毒和牛痘病毒组成的组。
6.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,所述病毒为黄热病毒或寨卡病毒。
7.权利要求1所述细胞系的制备方法,其特征在于,所述细胞系不需要血清来用于细胞生长,并且无需附着用载体,可以悬浮培养,该方法包括:
(a)准备从WHO获得的Vero细胞;
(b)使所述Vero细胞适应在无血清培养基中生长;以及
(c)使步骤(b)中选出的贴壁Vero细胞在没有附着用载体的悬浮状态下生长。
8.一种生产疫苗用病毒的方法,其特征在于,该方法包括:
(a)将权利要求1的Vero细胞以1×105-9×105个细胞/mL的浓度接种到无血清细胞培养基中;
(b)在转瓶中使Vero细胞增殖到5.0×105-4.7×106个细胞/mL的细胞密度,其中包括在维持搅拌速度为40-90rpm且pH为6.5-7.5的培养条件下培养所述细胞的步骤;
(c)用黄热病毒或寨卡病毒感染增殖的Vero细胞;
(d)培养被感染的增殖的Vero细胞;以及
(e)从细胞培养组合物中分离黄热病毒或寨卡病毒。
9.根据权利要求7所述的方法,其特征在于,在所述步骤(b)期间,将新鲜培养基添加到细胞培养物中,或者去除部分培养基并用新鲜培养基替换。
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