[发明专利]用于基因编辑的TAL效应物核酸酶

权利要求书

1.一种组合物，包括：

第一核酸，其编码能够与第一靶基因的第一半位点序列结合的第一转录激活因子样(TAL)效应物核酸酶单体，以及

第二核酸组，每种第二核酸编码能够与所述第一靶基因或一组第二靶基因的第二半位点序列结合的第二TAL效应物核酸酶单体，

其中：

所述第一半位点序列是保守序列；

所述第一半位点序列和每种第二半位点序列不同，并且由间隔序列隔开；以及

所述第一TAL效应物核酸酶单体能够与每种所述第二TAL效应物核酸酶单体形成二聚体。

2.根据权利要求1所述的组合物，其中，当所述第一TAL效应物核酸酶单体与所述第一半位点序列结合并且所述第二TAL效应物核酸酶单体与所述第二半位点序列结合时，所述二聚体能够在活细胞内切割所述靶基因。

3.根据权利要求1或2所述的组合物，其中，所述第一半位点序列是100％保守序列。

4.根据权利要求1-3中任一项所述的组合物，其中，所述间隔序列的长度为约15个至约18个核苷酸。

5.根据权利要求1-4中任一项所述的组合物，其中，所述第一核酸包括FokI核酸内切酶结构域。

6.根据权利要求1-5中任一项所述的组合物，其中，每种第二核酸包括FokI核酸内切酶结构域。

7.根据权利要求1-6中任一项所述的组合物，其中，所述第一核酸在载体中。

8.根据权利要求1-7中任一项所述的组合物，其中，每种第二核酸在载体中。

9.根据权利要求1-8中任一项所述的组合物，其中，所述第一核酸和所述第二核酸组在单个载体中。

10.根据权利要求1-9中任一项所述的组合物，其中，所述第一核酸是质粒中的mRNA。

11.根据权利要求1-10中任一项所述的组合物，其中，每种第二核酸是质粒中的mRNA。

12.根据权利要求1-11中任一项所述的组合物，其中，所述第一核酸和所述第二核酸组是质粒中的mRNA。

13.根据权利要求1-12中任一项所述的组合物，其中，所述第二核酸组包括三种或更多种第二核酸。

14.根据权利要求1-13中任一项所述的组合物，其中，所述第二核酸组包括四种或更多种第二核酸。

15.根据权利要求1-14中任一项所述的组合物，其中，所述第一靶基因是大豆基因的FAD3家族的基因。

16.根据权利要求1-15中任一项所述的组合物，其中，每种第二靶基因是大豆基因的FAD3家族的基因。

17.根据权利要求1-16中任一项所述的组合物，其中，所述第一靶基因是大豆FAD3A基因的等位基因。

18.根据权利要求1-16中任一项所述的组合物，其中，所述第一靶基因是大豆FAD3B基因的等位基因。

19.根据权利要求1-16中任一项所述的组合物，其中，所述第一靶基因是大豆FAD3C基因的等位基因。

20.根据权利要求17-19中任一项所述的组合物，其中，所述第二靶基因是大豆FAD3A基因的等位基因。