[发明专利]修饰的干细胞及其使用方法

权利要求书

1.产生干细胞(SC)的方法，包括：

a)修饰SC，以相对于野生型SC的HLA-I、HLA-II或其组合减少表达；和

b)引入外源构建体，以表达包括CR1和/或CD24以及任选地CD47、CD55、CD46、CD59和HLA-E-单链三聚体中的一种或多种的免疫逃避基因。

2.权利要求1所述的方法，其中所述免疫逃避基因包括CR1和CD24。

3.权利要求1所述的方法，其中所述免疫逃避基因包括CR1、CD24以及CD46、CD47、CD55、CD59和HLA-E-单链三聚体中的一种或多种。

4.权利要求1所述的方法，其中所述免疫逃避基因包括CR1、CD24、CD47、CD55、CD46、CD59和任选地HLA-E-单链三聚体。

5.权利要求1至4中任一项所述的方法，进一步包括引入外源构建体以表达PDL1和HLA-G-单链三聚体中的一种或多种。

6.权利要求1所述的方法，其中HLA-I的表达通过消除TAP1或β2M的表达而降低。

7.权利要求1所述的方法，其中HLA-II的表达通过消除CD74和CIITA的表达而降低。

8.权利要求1所述的方法，其中修饰包括使用CRISPR/Cas9靶向突变的基因组编辑。

9.权利要求1的方法，其中引入外源构建体是通过慢病毒转导进行的。

10.权利要求1所述的方法，其中引入外源构建体是使用腺相关病毒(AAV)构建体进行的。

11.权利要求10所述的方法，其中所述AAV构建体是修饰的AAVS构建体，所述AAV构建体靶向位于PPPR12C的内含子区域中的内源性AAV整合位点。

12.权利要求1至11中任一项所述的方法，进一步包括将所述SC分化为β细胞。

13.通过权利要求1至11中任一项所述的方法产生的干细胞(SC)。

14.权利要求13所述的SC，其中：

(i)HLA-I和HLA-II的表达被消除；和

(ii)所述SC表达CR1和/或CD24以及任选地CD47、CD55、CD46、CD59和HLA-E-单链三聚体中的一种或多种。

15.权利要求14所述的SC，其中所述SC进一步表达PDL1和HLA-G-单链三聚体。

16.权利要求13至15中任一项所述的SC，其中所述SC是小鼠或人SC。

17.权利要求16所述的SC，其中所述SC是胚胎SC或诱导多能SC。

18.用权利要求13至17中任一项所述的SC、或权利要求13至17中任一项所述的SC的后代治疗需要其的受试者中的疾病或障碍的方法。

19.权利要求18所述的方法，其中所述疾病或障碍是自身免疫性疾病或神经退行性疾病。

20.权利要求18所述的方法，其中所述疾病或障碍是癌症。

21.权利要求18所述的方法，其中所述疾病或障碍是1型糖尿病。

22.权利要求12所述的方法产生的β细胞。