[发明专利]修饰的干细胞及其使用方法

说明书

本发明提供了修饰的干细胞(SC)和SC治疗疾病的用途。

相关申请的交叉引用

本申请要求根据35 U.S.C.§119(e)于2019年10月10日提交的美国临时专利申请序列号62/913,568的优先权权益，其内容通过引用整体并入本文。

政府支持声明

本发明是根据美国国立卫生研究院授予的R21 AI132910在政府支持下进行的。政府对本发明享有一定的权利。

技术领域

本发明总体上涉及医学领域，并且更具体地涉及基因修饰的(geneticallymodified)干细胞(SC)如基因修饰的人胚胎干细胞(hESC)以及它们治疗疾病的用途。

背景技术

细胞移植形式的再生医学是治疗顽固性医学状况诸如糖尿病、心脏病和神经退行性疾病的的最有前途的疗法之一。然而，在临床上实施细胞移植的主要障碍是供体细胞的免疫排斥，特别是当这些源自外源宿主时。虽然通过施用免疫抑制剂药物来部分解决免疫排斥是可能的，但这些通常带来严重的不良副作用。

器官移植为治疗患有某些疾病的人提供了机会，并且可以让器官受体过上完整的生活。例如，对于终末期肝病、肺病和心脏病，移植总体上是唯一可用的治疗选择。在免疫抑制药物和辅助护理方面取得了进步，从而提高了患者和移植物的短期存活率。然而，这种成功受到几个问题的阻碍，如移植物长期存活率低、需要持续的免疫抑制药物、以及器官供需之间的差异。

已经开发了同种异体移植以增加供体组织的供应。然而，限制同种异体应答是主要挑战。除非受体的免疫系统被下调，否则同种异体移植不会成功。现行临床标准是使用全身性免疫抑制药物，这降低了移植物的功效并且大大增加感染的风险。

在了解免疫监视以及基因修饰细胞(如SCs)的能力方面的进展，使得能够产生避免免疫排斥的细胞。然而，仍然需要开发用于细胞移植疗法的改进技术。

发明内容

本发明提供了基因修饰的SC、以及其产生方法和治疗疾病如1型糖尿病(T1D)的用途。

因此，在实施方式中，本发明提供了产生基因修饰的SC的方法。在一个方面，方法包括：a)修饰SC，以相对于野生型SC的HLA-I、HLA-II或其组合减少表达；和b)引入外源构建体，以表达包括CR1和/或CD24以及任选地CD47、CD55、CD46、CD59和/或HLA-E-单链三聚体中的一种或多种的免疫逃避基因(immune evasion gene)。

在一些方面，免疫逃避基因包括CR1和CD24以及任选地CD47、CD55、CD46、CD59和/或HLA-E-单链三聚体中一种或多种。

在一些方面，SC可以被进一步修饰，以表达PDL1和/或HLA-G-单链三聚体中的一种或多种。

在一些方面，免疫逃避基因包括CR1、CD24、CD47、CD55、CD46、CD59和HLA-E-单链三聚体。

在另一实施方式中，本发明提供了由本发明的方法产生的基因修饰的SC。

在又一实施方式中，本发明提供了修饰的SC，其中：(i)HLA-I和HLA-II的表达被消除；并且(ii)SC被基因修饰，以表达CR1和/或CD24以及任选地CD47、CD55、CD46、CD59和/或HLA-E-单链三聚体中一个或多个。

在再一实施方式中，本发明提供了源自本发明的基因修饰SC的细胞系。