[发明专利]用晶体形式的包被基质进行胃保护的颗粒状细菌、其制备方法及其组合物

说明书

本发明涉及晶体胃保护颗粒状细菌，如包被有优选减少量的脂质包被基质的颗粒形式的细菌菌株，所述脂质包被基质具有晶体形式。此外，本发明涉及所述晶体胃保护颗粒状细菌的制备方法。最后，本发明涉及包含所述晶体胃保护颗粒状细菌的组合物。

本发明涉及晶体胃保护颗粒状细菌，如以优选减少量的脂质包被基质包被的颗粒形式的细菌菌株，所述脂质包被基质具有晶体形式。此外，本发明涉及一种制备所述晶体胃保护颗粒状细菌的方法。最后，本发明涉及包含所述晶体胃保护颗粒状细菌的组合物。

益生菌菌株被定义为“活的微生物，当以足够的量施用时，其会给宿主赋予健康益处”。为了发挥它们的有益作用，存在于益生菌产品或活生物治疗产品(LBP)(包含活细菌菌株的药物)中的活细菌菌株，一旦被口服摄入，必须通过胃区域并以活的状态到达肠道，以便在肠道内定殖并发挥其功能。为了保护细菌菌株免受胃的酸性pH环境的影响，已知用各种胃保护基质，如脂质包被基质来包被细菌菌株。

为了发挥它们的有益作用，益生菌或活细菌菌株还必须在产品的整个保质期内保持有效，直至食用。稳定性主要受到温度和湿度的损害，因此对前者的理想控制和对后者的保护可以帮助将益生菌或活细菌菌株维持在最佳条件下以发挥完全的功效。

Marino等，Journal of Functional Foods，35(2017)报告了一项关于包含饱和甘油单酯的乳化结构在冷藏长达56天期间对益生菌活力的影响的研究。该文献描述了益生菌鼠李糖乳杆菌的制备，首先冷冻干燥，然后与包含脂质相(葵花油)、水相和甘油单酯(MG)-助表面活性剂(CO)的液体混合物混合。然而，细菌菌株是冷冻干燥的，但不是颗粒状的。此外，所使用的方法涉及使用可能损害细菌的活力和/或功能的液体混合物。

文献CN 109480038描述了一种用于生产包含益生菌和巧克力的耐热产品的方法。然而，该文献没有描述具有层状晶体结构涂层的颗粒形式的细菌，也没有描述能够在不损害细菌生存力的情况下获得这种涂层的方法。

然而，出于各种原因，胃保护方法可能导致包被的细菌菌株的活力和/或功能降低。例如，鉴于细菌菌株是不耐热的，通过加热脂质包被基质(或脂肪的熟化)进行调整(tempering)通常会导致细菌菌株的活力和/或功能降低。

本发明处理和解决的技术问题在于提供一种用于益生菌产品和活生物治疗产品(LBP)的细菌菌株的制备方法(简称本发明方法)，其用使细菌细胞具有低死亡率(即保持膜完整性)的包被基质进行胃保护，并因此保持所述细胞在胃保护方法之前具有的活力和功能。同时，本发明解决的技术问题在于通过本发明的所述方法提供细菌菌株或含有它们的组合物(益生菌产品或LBP)，其具有高数量的活的和有功能的细菌，其中，所述包被基质发挥有效的胃保护作用和/或防止成品形式中的残留湿气和/或由于初级包装材料不完全不透湿和/或在打开包装后不可避免地暴露于环境湿气后湿度增加。

鉴于上述技术问题并经过大量的研究和开发阶段，在本发明中，申请人提供了一种方法(胃保护方法，简称本发明的方法)，其主要包括以下步骤：(I)将“裸”(未包被)细菌菌株制粒以获得颗粒状细菌菌株，(II)用脂质包被基质包被所述颗粒状细菌菌株，优选地以减少量包被，以获得原样的胃保护的颗粒状细菌菌株(或裸或未包被)，(III)将所述胃保护的颗粒状细菌菌株本身调整(或熟化)以获得用晶体形式的包被基质进行胃保护的颗粒状细菌，如下文所述并在本权利要求中要求保护。

在本发明的上下文中，就细菌菌株或颗粒状细菌菌株而言，术语“原样”或“裸露的”或“未包被的”本身是同义词并且可以互换使用。所有这些术语均指未包被或非微囊化的细菌菌株或颗粒状细菌菌株。

通过本发明的方法提供了用晶体形式的脂质包被基质进行胃保护的颗粒形式的细菌，其具有相对于胃保护方法之前存在的量几乎没有变化的活的和功能性细菌细胞的量(方法死亡率低)。

换言之，本发明的方法允许细菌在不导致细胞死亡的情况下对细菌进行制粒、包被和调整，例如通过流式细胞术(或流式细胞荧光术)进行评估。