[发明专利]使用与固体表面结合的亲和配体分离和离析核酸

权利要求书

1.从样品中分离靶标大分子的方法，包括以下步骤：

a.选择将会与靶标大分子结合的亲和配体；

b.将所述亲和配体结合到表面以产生偶联的表面亲和配体；

c.将所述偶联的表面亲和配体放置于容器中；

d.将含有所述靶标大分子的样品引入所述偶联的表面亲和配体，并使所述偶联的表面亲和配体与所述样品孵育一段停留时间，其中所述靶标大分子与亲和配体结合；和

e.将结合靶标大分子的所述偶联的表面亲和配体与从中去除了靶标大分子的样品分离。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述靶标大分子是双链DNA、单链DNA、双链RNA、单链RNA、双链信使RNA、单链信使RNA、锁核酸(LNA)、肽核酸(PNA)、病毒、含有低核苷酸或寡核苷酸的蛋白质、含有低核苷酸或寡核苷酸的脂质、其它低核苷酸或寡核苷酸、其任意片段或其任意组合。

3.根据权利要求1所述的方法，其中所述靶标大分子是DNA、RNA、其任意片段或其任意组合。

4.根据权利要求1所述的方法，其中所述靶标大分子是双链DNA。

5.根据权利要求1所述的方法，其中所述亲和配体是嵌入剂、小沟结合剂、大沟结合剂或其任意组合。

6.根据权利要求5所述的方法，其中所述亲和配体是选自由吖啶类、聚咪唑类、吲哚类、吡咯类、菲啶类、苯并噻唑-喹啉或苯并噁唑-喹啉的花菁、吩噁嗪类、吩噻嗪类、蒽醌类和呋喃香豆素类组成的组的化合物，并且其中所述化合物已被改性以包括能够将亲和配体结合到所述表面的连接基团。

7.根据权利要求1所述的方法，还包括以下步骤：

f.收集基本上不含所述靶标大分子的洗脱液。

8.根据权利要求1所述的方法，还包括以下步骤：

f.从所述偶联的表面亲和配体中洗脱并回收所述靶标大分子。

9.根据权利要求1所述的方法，其中步骤a)包括：

i.选择将会与靶标大分子结合的嵌入剂、小沟结合剂、大沟结合剂或其任意组合；和

ii.改性所述嵌入剂、小沟结合剂、大沟结合剂或其组合以包括连接基团，从而产生能够结合到表面的亲和配体。

10.根据权利要求1所述的方法，其中所述亲和配体不结合样品中的任何蛋白质。

11.根据权利要求1所述的方法，其中所述亲和配体是改性吩噻嗪、改性Hoechst染料、改性的苯并噻唑-喹啉的花菁或改性的苯并噁唑-喹啉的花菁。

12.根据权利要求11所述的方法，其中所述亲和配体是已被改性以包括以环氧基、羧基、卤化物或氨基为末端的间隔基的吩噻嗪、Hoechst染料、苯并噻唑-喹啉的花菁或苯并噁唑-喹啉的花菁。

13.根据权利要求12所述的方法，其中所述亲和配体是单羧基亚甲基蓝。

14.根据权利要求12所述的方法，其中所述亲和配体是改性Hoechst染料，所述Hoechst染料选自由Hoechst 33258、Hoechst 33342和Hoechst 34580组成的组，并且所述亲和配体已被改性以包括以环氧基、羧基、卤化物或氨基为末端的间隔基，其中所述间隔基含有1-30个原子。

15.根据权利要求14所述的方法，其中所述亲和配体是左侧烷基氨基改性的Hoechst染料。

16.根据权利要求14所述的方法，其中所述亲和配体是右侧烷基氨基改性的Hoechst染料。