[发明专利]细胞外囊泡的回收方法和采血管在审
申请号: | 202080089420.5 | 申请日: | 2020-12-22 |
公开(公告)号: | CN114902043A | 公开(公告)日: | 2022-08-12 |
发明(设计)人: | 顾然;犬塚达俊 | 申请(专利权)人: | 富士瑞必欧株式会社;合同会社予幸集团中央研究所 |
主分类号: | G01N33/48 | 分类号: | G01N33/48;C12M1/26;C12N1/02;C12Q1/04 |
代理公司: | 北京市柳沈律师事务所 11105 | 代理人: | 张涛 |
地址: | 日本*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 细胞 外囊泡 回收 方法 血管 | ||
1.一种细胞外囊泡的回收方法,其包含:
(1)将全血与非离子性表面活性剂和螯合剂混合,生成包含细胞外囊泡、非离子性表面活性剂和螯合剂的混合液的步骤;以及
(2)从所述混合液中分离细胞外囊泡的步骤。
2.根据权利要求1所述的方法,其中,
非离子性表面活性剂为具有聚氧乙烯醇结构的非离子性表面活性剂。
3.根据权利要求2所述的方法,其中,
具有聚氧乙烯醇结构的非离子性表面活性剂为醇乙氧基化物。
4.根据权利要求2所述的方法,其中,
具有聚氧乙烯醇结构的非离子性表面活性剂为聚氧乙烯-聚氧化烯嵌段共聚物。
5.根据权利要求1~4中任一项所述的方法,其中,
非离子性表面活性剂为HLB 18以上的非离子性表面活性剂。
6.根据权利要求1~5中任一项所述的方法,其中,
所述混合液中的非离子性表面活性剂的浓度为0.01~10重量/体积%。
7.根据权利要求1~6中任一项所述的方法,其中,
螯合剂为羟乙基亚氨基二乙酸(HIDA)、次氮基三乙酸(NTA)、羟乙基乙二胺三乙酸(HEDTA)、乙二胺四乙酸(EDTA)、乙二胺四(亚甲基膦酸)(EDTM P)、乙二醇醚二胺四乙酸(EGTA)、或它们的盐。
8.根据权利要求1~7中任一项所述的方法,其中,
所述混合液中的螯合剂的浓度为10mM~1000mM。
9.根据权利要求1~8中任一项所述的方法,其中,
混合在将全血装入包含非离子性表面活性剂和螯合剂的采血管后进行。
10.根据权利要求1~9中任一项所述的方法,其中,
分离通过下述(A)~(C)中的任一种进行:
(A)从所述混合液中分离得到上清;
(B)对所述混合液使用与细胞外囊泡的表面标记结合的物质;或
(C)从所述混合液中分离得到上清、以及对上清使用与细胞外囊泡的表面标记结合的物质。
11.根据权利要求1~10中任一项所述的方法,其中,
细胞外囊泡为外泌体。
12.一种细胞外囊泡的分析方法,其包含:
(1)将全血与非离子性表面活性剂和螯合剂混合,生成包含细胞外囊泡、非离子性表面活性剂和螯合剂的混合液的步骤;
(2)从所述混合液中分离细胞外囊泡的步骤;以及
(3)对细胞外囊泡进行分析的步骤。
13.一种采血管,其包含非离子性表面活性剂和螯合剂。
14.根据权利要求13所述的采血管,其中,
采血管中的非离子性表面活性剂的量为0.1~2000mg。
15.根据权利要求13或14所述的采血管,其中,
采血管中的螯合剂的量为3.8~3800mg。
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