[发明专利]一种气相色谱法测定阿哌沙班中间体的方法

说明书

本发明提出的是一种气相色谱法测定阿哌沙班中间体的方法，首先分别取5‑氯戊酰氯和相应杂质衍生化反应作为储备溶液，再分别量取各储备液配制系统适用性溶液，量取待测产品配制供试品溶液和自身对照溶液；再量取系统适用性溶液注入气相色谱仪，根据色谱图计算各杂质对应的校正因子，最后量取自身对照溶液和供试品溶液进行气相色谱测定，计算校正后的峰面积，从而测定供试品中5‑氯戊酰氯及其相关杂质的含量。本发明能够有效分离5‑氯戊酰氯中的杂质，为控制阿哌沙班中间体质量建立了严格的标准，降低副反应发生的可能性以及产品的杂质水平，对于工业化生产中控制阿哌沙班的原料质量有至关重要的作用，降低生产成本，增加产品竞争力。

技术领域

本发明涉及的是阿哌沙班中间体的质量控制方法，具体涉及一种气相色谱法测定阿哌沙班中间体5-氯戊酰氯的方法，属于医药分析技术领域。

背景技术

阿哌沙班是一种强效、口服有效的可逆、直接、高选择性的Xa因子活性位点抑制剂，其抗血栓活性不依赖抗凝血酶III。阿哌沙班可以抑制游离及与血栓结合的Xa因子，并抑制凝血酶原活性。阿哌沙班对血小板聚集无直接影响，但间接抑制凝血酶诱导的血小板聚集。通过对Xa因子的抑制，阿哌沙班抑制凝血酶的产生，并抑制血栓形成。在动物模型中进行的临床前试验结果显示，阿哌沙班在不影响止血功能的剂量水平下，具有抗栓作用，有效可预防动脉及静脉血栓。

在阿哌沙班的制备方法中，5-氯戊酰氯是一种重要的中间体产物，如发明专利申请CN101967145A公开的阿哌沙班中间体制备方法，其中将三乙胺加入到无水四氢呋喃中，保持在冷却状况下往反应混合液中缓慢滴加5-氯戊酰氯与无水溶剂的混合溶液，滴毕反应液升温进行反应；发明专利申请CN104341336A公开的阿哌沙班中间体制备方法，将芳香胺在惰性溶剂中，以氢氧化钾、碳酸钾、碳酸钠、碳酸氢钠和碳酸氢钾做缚酸剂和环合剂，与5-氯戊酰氯反应一锅法直接获得中间体化合物。然而，现有的制备工艺中对于5-氯戊酰氯的质量控制并无相应的标准体系，也缺少对应的检测和控制手段，急需一种能够精确测定5-氯戊酰氯含量的方法，以实现对该中间体纯度的控制，提高阿哌沙班产品的整体质量。

发明内容

本发明的目的在于克服现有阿哌沙班中间体制备工艺存在的上述缺陷，提出一种气相色谱法测定阿哌沙班中间体5-氯戊酰氯的方法。

本发明的技术解决方案：一种气相色谱法测定阿哌沙班中间体的方法，具体包括如下步骤：

（1）分别取5-氯戊酰氯、4-戊烯酰氯、3-甲基吡啶、4-氯戊酰氯、γ-戊内酯、5-氯戊腈、δ-戊内酯各约1ml，分别滴加至含有5ml甲醇和1ml 3-甲氧基吡啶的25ml量瓶中，混匀后衍生化反应20min，然后加二氯甲烷稀释至刻度，摇匀，作为储备溶液；分别精密量取各储备液0.1ml，置于同一20ml量瓶中，加二氯甲烷稀释至刻度，摇匀，作为系统适用性溶液；

（2）精密量取待测5-氯戊酰氯产品1ml，缓慢滴加至含有5ml甲醇和1ml 3-甲氧基吡啶的25ml容量瓶中，混匀后室温反应20min，然后加二氯甲烷稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；精密量取供试品溶液0.1ml，置于20ml量瓶中，加二氯甲烷稀释至刻度，摇匀，作为自身对照溶液；

（3）精密量取步骤（1）制备的系统适用性溶液1μl注入气相色谱仪，进行气相色谱测定，记录色谱图，根据色谱图中的浓度和峰面积数据进行线性回归，并计算各杂质对应的校正因子；再精密量取步骤（2）制备的自身对照溶液和供试品溶液各1µl注入气相色谱仪，进行气相色谱测定，记录色谱图，根据供试品溶液色谱图中的各杂质峰面积和校正因子，计算校正后的峰面积，从而测定供试品中5-氯戊酰氯及其相关杂质的含量。

进一步的，所述气相色谱仪的测定条件为：采用14% 氰丙基-苯基/86% 二甲基聚硅氧烷填料的毛细管柱，高纯氮气为载气，分流比为50:1，柱流量为2.2ml/min，进样量1μl，进样口温度为250℃；采用氢火焰离子化检测器，工作温度为250℃。