[发明专利]一种解淀粉芽孢杆菌、筛选方法、鉴定方法及应用

权利要求书

1.一种解淀粉芽孢杆菌，其特征在于，所述解淀粉芽孢杆菌为E312菌株，保藏号为CGMCCNO:6796；

所述的16S rDNA序列SEQ ID NO:1所示；

所述解淀粉芽孢杆菌的筛选方法包括以下步骤：

(1)菌株分离，将水样接种于5mL无菌离心管中，摇匀后于90℃恒温水浴锅中水浴10min，尽可能除去其他微生物，涂布于2216E固体培养基，30℃培养24h，取不同形态的单菌落共15株，分别命名为E301～E315，在培养基上划线纯化，2216E液体培养基培养，加入15％甘油-80℃保存；

(2)菌株筛选，为检测分离菌株是否生产胞外脂肪酶、蛋白酶和纤维素酶，将单菌落分别接种于2216E固体培养基中；30℃培养48小时后，观察和测量菌落周围透明圈大小，筛选分泌胞外酶的细菌。

2.一种如权利要求1所述解淀粉芽孢杆菌在改善海水养殖水体环境中的应用，其特征在于，将所述解淀粉芽孢杆菌的发酵液添加到水产动物养殖水体中。

3.一种如权利要求1所述解淀粉芽孢杆菌在喂食南美白对虾中的应用。

4.一种动物饲料添加剂，其特征在于，所述动物饲料添加剂包含权利要求1所述解淀粉芽孢杆菌。

5.一种水体净化剂，其特征在于，所述水体净化剂包含权利要求1所述解淀粉芽孢杆菌。

6.一种海产品保鲜剂，其特征在于，所述海产品保鲜剂包含权利要求1所述解淀粉芽孢杆菌。

7.一种如权利要求1所述解淀粉芽孢杆菌的鉴定方法，其特征在于，所述解淀粉芽孢杆菌的鉴定方法应用细菌16SrDNA基因通用引物，正向引物为27F，反向引物为1492R，扩增海洋细菌E312的16S rDNA序列，经过扩增产物测序得到大小为1406bp的基因片段，碱基序列如SEQ ID NO:1所示；将测序结果与NCBI及EzBioCloud数据库中的16SrDNA序列进行同源性比对，结果显示菌株E312与解淀粉芽孢杆菌DSM 7T亲缘关系最近，同源性达到99.64％；选取菌株E312及同源性相近菌株的16S rDNA序列，试用MEGA4.0、NJ算法构建系统进化树，得到进化树结果。