[发明专利]一种甲功两项抗体化学发光检测试剂盒

权利要求书

1.一种甲功两项抗体化学发光检测试剂盒，其特征在于，包括包被有异硫氰酸荧光素的微孔反应板、异硫氰酸荧光素标记物、碱性磷酸酶标记物、校准品、发光底物液和浓缩清洗液，其中，所述异硫氰酸荧光素标记物包括异硫氰酸荧光素标记的TG抗原偶联物、异硫氰酸荧光素标记的TPO抗原偶联物；所述碱性磷酸酶标记物为碱性磷酸酶标记的抗人IgG抗体偶联物。

2.根据权利要求1所述的甲功两项抗体化学发光检测试剂盒，其特征在于，所述包被有异硫氰酸荧光素的微孔反应板的制备方法包括：

采用包被缓冲液稀释异硫氰酸荧光素，得到稀释后的异硫氰酸荧光素溶液；

将稀释后的异硫氰酸荧光素溶液加入所述微孔反应板，进行预包被，之后甩去反应板上的包被缓冲液；

将封板缓冲液加入所述微孔反应板，将所述微孔反应板置于37℃环境恒温放置预设时间，之后去掉封板缓冲液，烘干；

对所述微孔反应板进行密封，得到所述包被有异硫氰酸荧光素的微孔反应板。

3.根据权利要求1所述的甲功两项抗体化学发光检测试剂盒，其特征在于，所述异硫氰酸荧光素标记物的制备方法包括：

分别将TG抗原、TPO抗原单独溶于Tris缓冲液中，配制成1-5mg/ml的TG抗原溶液、1-5mg/ml的TPO抗原溶液；

采用SDS将异硫氰酸荧光素配制成1-5mg/ml的异硫氰酸荧光素溶液，将所述异硫氰酸荧光素溶液分别加入到TG抗原溶液和TPO抗原溶液中，在2-8℃温度条件下避光震荡反应预设时间，其中，所述异硫氰酸荧光素溶液与TG抗原溶液和TPO抗原溶液的比率均为10～30μg/mg；

向震荡反应后得到的溶液中分别加入NH₄Cl溶液，避光震荡反应后，用PBS避光透析过夜；

向透析过夜后的溶液中加入甘油分别得到所述异硫氰酸荧光素标记的TG抗原偶联物、异硫氰酸荧光素标记的TPO抗原偶联物。

4.根据权利要求1所述的甲功两项抗体化学发光检测试剂盒，其特征在于，所述碱性磷酸酶标记物的制备方法包括：

采用改良过碘酸钠-乙二醇法对抗人IgG抗体进行碱性磷酸酶标记，得到抗人IgG抗体碱性磷酸酶标记物；

将抗人IgG抗体碱性磷酸酶标记物与缓冲液按照体积比为1:100的比例稀释，得到所述碱性磷酸酶标记物；

其中，所述缓冲液的组分及含量为：

TBS缓冲液 0.1-0.5mol/L

胎牛血清 100-200g/L。

5.根据权利要求1所述的甲功两项抗体化学发光检测试剂盒，其特征在于，所述校准品包括TGAb校准品和TPOAb校准品，其中TGAb校准品的浓度为0-1200IU/mL，所述TPOAb校准品的浓度为0-400IU/mL。

6.根据权利要求1所述的甲功两项抗体化学发光检测试剂盒，其特征在于，所述微孔反应板的材料为聚苯乙烯。

7.根据权利要求2所述的甲功两项抗体化学发光检测试剂盒，其特征在于，所述包被缓冲液为pH 7-7.5、15-20mmol/L的Na₂CO₃-NaHCO₃缓冲溶液。

8.根据权利要求2所述的甲功两项抗体化学发光检测试剂盒，其特征在于，所述异硫氰酸荧光素的稀释浓度为3-6μg/mL。

9.根据权利要求2所述的甲功两项抗体化学发光检测试剂盒，其特征在于，所述封板缓冲液的组分及含量为：

PBS-T 0.1-0.2mol/L

BSA 1％-2％

明胶 0.1％-0.2％。

10.根据权利要求1所述的甲功两项抗体化学发光检测试剂盒，其特征在于，所述发光底物液的组分及含量为：