[发明专利]用于沙门氏菌检测和消杀的核酸适配体-量子点生物传感器、其制备方法及应用

权利要求书

1.用于沙门氏菌检测和消杀的核酸适配体-量子点生物传感器，其特征在于，在沉积有PDA涂层的Fe₃O₄纳米粒子表面连接经量子点标记的沙门氏菌核酸适配体Aptamer C；并将修饰有荧光素的互补链Strand A与上述Aptamer C配对；

所述沙门氏菌核酸适配体Aptamer C的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；

所述互补链Strand A的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示；

所述荧光素为FAM或者FITC；

所述的量子点为碳量子点、石墨烯量子点、核壳类和复合材料的无毒荧光量子点中的任意一种。

2.权利要求1所述用于沙门氏菌检测和消杀的核酸适配体-量子点生物传感器的制备方法，其特征在于，步骤如下：

(1)将经量子点标记的Aptamer C链活化并与沉积有PDA涂层的Fe₃O₄纳米粒子连接：取160μL 2μM的量子点标记的Aptamer C链与30μL 10mg/L的NHS和30μL 10mg/L的EDC混合进行活化；将上述活化的量子点标记的Aptamer C链与沉积有PDA涂层的Fe₃O₄纳米粒子以体积比为3∶1的比例混合；在室温下温育30分钟并轻轻摇动后，以10,000rpm离心25分钟除去游离的Aptamer C链，并用pH 7.0的10mM PBS冲洗3次，将获得的结合物重新分散在500μL PBS缓冲液中；

(2)将修饰有荧光素的互补链Strand A通过碱基互补配对作用借助氢键与步骤(1)获得的结合物的Aptamer C链进行结合：将200μL 2μM的Strand A加入步骤(1)结合物分散的500μL PBS缓冲液中混合；在室温下温育30分钟并轻轻摇动后，以10,000rpm离心25分钟除去游离的Strand A，并用pH 7.0的10mM PBS冲洗3次，即得。

3.权利要求2所述方法制备的核酸适配体-量子点生物传感器在食品中沙门氏菌检测和消杀中的应用。

4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述食品为固相食品。

5.使用权利要求1所述核酸适配体-量子点生物传感器检测和消杀食品中沙门氏菌的方法，其特征在于，步骤如下：

将权利要求1所述核酸适配体-量子点生物传感器分散在磷酸盐缓冲盐水中，制备成浓度为0.32μM的溶液，将上述分散液添加到食品表面用于检测其中的沙门氏菌，沙门氏菌因高亲和力作用与Aptamer C链特异性结合，Strand A被菌竞争下来，Aptamer C链上的量子点会因失去A链上荧光素的猝灭作用而显示出荧光，通过检测量子点的荧光用于测定沙门氏菌的含量；

在量子点显示的荧光区域，利用1.5W/cm²808nm近红外光进行持续照射；杀菌完成后将食品置于磁场中或者在磁铁的作用下分离出Fe₃O₄纳米粒子，并将食品表面修饰有荧光素的Strand A用水洗掉即可。

6.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述固相食品为肉制品、果蔬制品中的一种。