[发明专利]用于沙门氏菌检测和消杀的核酸适配体-量子点生物传感器、其制备方法及应用

说明书

本发明公开了一种用于沙门氏菌检测和消杀的核酸适配体‑量子点生物传感器、其制备方法及应用，属于食品致病菌的检测及灭活技术领域。本发明的生物传感器是在沉积有聚多巴胺(PDA)涂层的Fe₃O₄纳米粒子表面连接经量子点标记的沙门氏菌核酸适配体Aptamer C；并将修饰有荧光素的互补链Strand A与上述Aptamer C配对；用所述连接有Aptamer C和Strand A的Fe₃O₄纳米粒子进行沙门氏菌的检测。本发明的生物传感器的检测灵敏度为10CFU/100g，检测范围为10‑10⁴CFU/100g，具有很好的灵敏度和特异性；灭菌程度达95％以上，效果显著。

技术领域

本发明属于食品致病菌的检测及灭活技术领域，具体涉及一种用于沙门氏菌检测和消杀的核酸适配体-量子点生物传感器、其制备方法及应用。

背景技术

食品致病菌是可以引起食物中毒或以食品为传播媒介的致病性细菌。致病性细菌直接或间接污染食品及水源，人经口感染可导致肠道传染病、食物中毒以及畜禽传染病的流行。因此食源性致病菌是导致食品安全问题的重要来源。

食源性致病菌对人体健康的影响：(1)引起急性中毒：在一般情况下，食源性致病菌常引起急性中毒，轻者多以急性肠胃炎症状出现，如呕吐、恶心、腹痛、腹泻、发烧等，经过治疗可以恢复健康；但重者可出现呼吸、循环、神经等系统症状，抢救及时可转危为安，若耽误时机可能危及生命。有的急性中毒，虽经千方百计治疗，但仍给中毒者留下后遗症。(2)慢性中毒或潜在性危害：有些变质食物中的有毒物质含量少，或者由于本身毒性作用的特点，并不引起急性中毒，但长期使用，往往可造成慢性中毒，甚至可以表现出致癌、致畸、致突变的作用。使用腐败变质、霉变食物除了可以引起急性中毒外，还具有极其严重的潜在危害。

沙门氏菌是我国食源性疾病中引起食物中毒的最常见致病菌，约占中毒病例的70％-80％，而以肉、蛋、奶等畜产品被沙门氏菌污染所引起的中毒可占90％以上。沙门氏菌感染症为人畜共患感染性疾病，主要由食用遭受污染的食物导致，摄入含毒食品后，症状一般在12～14h内出现，有些潜伏期较长，典型症状包括发热、恶心、呕吐、腹泻及腹部绞痛，还伴有乏力、肌肉酸痛、视觉模糊、躁动不安和嗜睡等，但一般在发热后72h内会好转。沙门氏菌还可能会引起肠伤寒，肠胃炎和败血症疾病，而婴儿、老年人、免疫功能低下的患者则可能因沙门氏菌进入血液而出现严重且危及生命的菌血症，少数还会合并脑膜炎或骨髓炎。

沙门氏菌是美国食物中毒致死的主要原因。美国人对这种病菌一点都不陌生，每年全国大约报告40000例沙门氏菌感染病例。但实际的感染人数可能要达20倍以上，因为许多轻型病人可能未确诊，据不完全统计，每年大约有1000人死于急性沙门氏菌感染。致病菌的感染不但会造成巨大的经济损失，而且严重威胁人民群众的健康。因此，食品的致病菌检测和灭菌技术越来越重要。检测沙门氏菌一直以传统检测方法为主，非选择性和选择性增菌、可疑细菌分离等常规方法虽然经典可靠，但程序复杂、十分繁琐，不仅费时费力而且敏感性和特异性较差，漏检率较高。而免疫荧光法、酶联免疫吸附试验(ELISA)、聚合酶链反应(PCR)技术等方法需要使用指定的仪器设备、具备相应的试验条件和技能，难以在基层推广。因此迫切需要在此领域开展深入的研究工作，建立快速、有效的方法检测食品中的沙门氏菌并将其杀灭。

发明内容