[发明专利]挥发油复配增溶剂及挥发油酪氨酸酶活性抑制的测定方法在审
申请号: | 202110016930.6 | 申请日: | 2021-01-07 |
公开(公告)号: | CN112730017A | 公开(公告)日: | 2021-04-30 |
发明(设计)人: | 朱丽云;高永生;金斐;赵前 | 申请(专利权)人: | 中国计量大学 |
主分类号: | G01N1/38 | 分类号: | G01N1/38;G01N21/31 |
代理公司: | 台州杭欣专利代理事务所(普通合伙) 33333 | 代理人: | 尚竹亚 |
地址: | 310018 浙江省*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 挥发油 复配增 溶剂 酪氨酸 活性 抑制 测定 方法 | ||
1.挥发油复配增溶剂,其特征在于:所述复配增溶剂应用于挥发油对酪氨酸酶活性抑制测定中的将非水溶性挥发油助溶于水溶性体系中;
所述复配增溶剂包括二甲基亚砜、氢化蓖麻油、吐温20、乙醇;
所述复配增溶剂与所述挥发油按照一定比例添加,按照挥发油使用量的质量百分数所述二甲基亚砜不超过20%;所述氢化蓖麻油不超过1%;所述吐温20不超过1%;所述乙醇不超过10%。
2.根据权利要求1所述的挥发油复配增溶剂,其特征在于:二甲基亚砜20%、乙醇10%、吐温20 1%、氢化蓖麻油1%。
3.根据权利要求1所述的挥发油复配增溶剂,其特征在于:二甲基亚砜10%、乙醇5%、吐温20 1%、氢化蓖麻油0.5%。
4.根据权利要求1所述的挥发油复配增溶剂,其特征在于:二甲基亚砜10%、乙醇5%、吐温20 1%、氢化蓖麻油1%。
5.根据权利要求1所述的挥发油复配增溶剂,其特征在于:二甲基亚砜10%、乙醇10%、吐温20 0.5%、氢化蓖麻油1%。
6.根据权利要求1所述的挥发油复配增溶剂,其特征在于:二甲基亚砜20%、乙醇5%、吐温20 0.5%、氢化蓖麻油1%。
7.根据权利要求1所述的挥发油复配增溶剂,其特征在于:二甲基亚砜20%、乙醇10%、吐温20 0.5%、氢化蓖麻油0.5%。
8.根据权利要求1所述的挥发油复配增溶剂,其特征在于:所述挥发油是非水溶性芳香植物挥发油。
9.根据权利要求1所述的挥发油复配增溶剂,其特征在于:所述挥发油与水溶性体系的使用比例范围为1uL/mL-500uL/mL。
10.一种挥发油酪氨酸酶活性抑制的测定方法,其特征在于:包括如下步骤:
(1)准备PBS缓冲溶液待用;所述PBS缓冲溶液是pH6.86的磷酸盐缓冲液;
(2)应用步骤(1)中的PBS缓冲溶液配制酪氨酸酶液待用;
所述酪氨酸酶液是称取0.0036g的L-酪氨酸酶,用pH6.86的PBS缓冲溶液溶解后,用25ml容量瓶定容所获得的;
(3)应用步骤(1)中的PBS缓冲溶液配制L-酪氨酸溶液待用;所述L-酪氨酸溶液是称取0.0181g L-酪氨酸,用pH6.86的PBS缓冲溶液溶解后,用100ml容量瓶定容,摇匀所获得;
(4)准备挥发油待用;所述挥发油为非水溶性芳香植物挥发油;
(5)准备复配增溶剂各试剂、所述复配增溶剂包括权利要求1-9任意一项所述的复配增溶剂;
(6)将氢化蓖麻油在50-60℃隔水加热融化后,加入步骤(5)中的挥发油,搅拌均匀至澄清;
(7)在步骤(6)的溶液中依次加入吐温20,继而依次加入乙醇、吐温20和二甲基亚砜,搅拌至溶液均匀澄清;
(8)将步骤(7)所获得的澄清溶液加入到步骤(2)的PBS缓冲溶液中,搅拌至澄清;
(9)在步骤(8)所获得的澄清溶液中加入步骤(3)中的酪氨酸酶液,于30℃水浴10min;
(10)然后在步骤(9)的混合溶液中加入步骤(4)中的L-酪氨酸溶液,立即开始计时;测定反应20min时475nm波长下的吸光值以测定挥发油对。
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