[发明专利]挥发油复配增溶剂及挥发油酪氨酸酶活性抑制的测定方法

说明书

本发明公开了挥发油复配增溶剂及挥发油酪氨酸酶活性抑制的测定方法；复配增溶剂应用于挥发油对酪氨酸酶活性抑制测定中的将非水溶性挥发油助溶于水溶性体系中；复配增溶剂包括二甲基亚砜、氢化蓖麻油、吐温20、乙醇；复配增溶剂与挥发油按照一定比例添加，按照挥发油使用量的质量百分数二甲基亚砜不超过20％；氢化蓖麻油不超过1％；吐温20不超过1％；乙醇不超过10％。本发明的复配增溶剂对酪氨酸酶的抑制作用低，同时满足既能溶解挥发油使体系澄清透明且对酪氨酸酶的活性影响控制在10％以下的要求。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，特别是涉及一种挥发油复配增溶剂及挥发油酪氨酸酶活性抑制的 测定方法。

背景技术

酪氨酸酶抑制剂可以作为食品中的保鲜剂，或者农业中的抗虫剂，或者在医学和化妆品 中可作为皮肤脱色剂和增白美容化妆品等。

常见的酪氨酸酶抑制剂包括从动物中提取的多肽类化合物，植物中提取的黄酮类、糖苷 类、多酚类化合物以及微生物的代谢产物和化学合成物等。在这些抑制剂中，大部分为水溶 性成分。而近几年的研究报道中，存在着一类非水溶性物质——芳香植物挥发油(例如薰衣 草精油、柠檬精油或柠檬醛等)，其对酪氨酸酶活性抑制作用显著，是一类具有潜在应用价值 的活性化合物。

在现有技术中对于溶于挥发油中酪氨酸酶活性的测定，通常是将酪氨酸酶溶于挥发油中， 再使用单一的增溶剂将溶液溶于水溶性体系中进行测定，但是对于增溶剂本身对酪氨酸酶活 性的影响没有考虑，或是不能避免增溶剂对酪氨酸酶活性的影响。

例如在张青等在甜橙精油抑制酪氨酸酶的实验中，采用10％乙醇磷酸盐缓冲溶液配制甜 橙精油，实验中没有考虑乙醇本身对酪氨酸酶活性的抑制作用；南京师范大学姜洪芳等采用 二甲基亚砜作为薰衣草精油的溶剂溶解稀释薰衣草精油并进行酪氨酸酶抑制活性测定，实验 中没有考虑二甲基亚砜本身对酪氨酸酶活性的抑制作用；再如中国热带农业科学院廖良坤等 采用甲醇配置并稀释斜叶黄檀精油，并对酪氨酸酶活性进行抑制测定，甲醇容易引起蛋白质 变性，而酪氨酸酶是一种含铜蛋白，因此将一定程度上引起酪氨酸酶的失活；另外还有胡君 姣等将柠檬精油或柠檬醛等挥发性成分以一定比例加入0.5M pH6.86的PBS缓冲溶液中，然后 加入水溶性的体系进行酪氨酸酶活性抑制实验，但是由于柠檬精油或柠檬醛的非水溶特点， 在此体系下并不能真实反映柠檬精油或柠檬醛等对酪氨酸酶活性的抑制作用；上述对挥发油 中酪氨酸酶活性的测定中增溶剂对酪氨酸酶活性的影响都不低，这将影响芳香植物挥发油溶 液作为酪氨酸酶抑制剂的研究进展。

发明内容

本发明的目的是提供一种挥发油复配增溶剂，可以解决上述技术问题中的一个或是多个。

为了达到上述目的，本发明提出的技术方案如下：

挥发油复配增溶剂，所述复配增溶剂应用于挥发油对酪氨酸酶活性抑制测定中的将挥发 油助溶于水溶性体系中；

所述复配增溶剂包括二甲基亚砜、氢化蓖麻油、吐温20、乙醇；

所述复配增溶剂在挥发油溶于水溶性体系时，所述复配增溶剂与所述挥发油按照一定比 例添加，按照挥发油使用量的质量百分数所述二甲基亚砜不超过20％；所述氢化蓖麻油不超 过1％；所述吐温20不超过1％；所述乙醇不超过10％。

进一步的：二甲基亚砜20％、乙醇10％、吐温201％、氢化蓖麻油1％。

进一步的：二甲基亚砜10％、乙醇5％、吐温201％、氢化蓖麻油0.5％。

进一步的：二甲基亚砜10％、乙醇5％、吐温201％、氢化蓖麻油1％。

进一步的：二甲基亚砜10％、乙醇10％、吐温200.5％、氢化蓖麻油1％。

进一步的：二甲基亚砜20％、乙醇5％、吐温200.5％、氢化蓖麻油1％。