[发明专利]新冠病毒重组融合蛋白、其制备方法和应用

权利要求书

1.新冠病毒重组融合蛋白，其特征在于，其为：

i）如SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列；

ii）在i）的N端和/或C端连接标签得到的氨基酸序列。

2.编码权利要求1所述重组融合蛋白的核酸分子。

3.根据权利要求2所述的核酸分子，其特征在于，其核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。

4.含有权利要求2或3所述核酸分子的生物材料，所述生物材料为重组DNA、表达盒、转座子、质粒载体、病毒载体、工程菌或转基因细胞系。

5.权利要求1所述重组融合蛋白的制备方法，其特征在于，包括：构建含有编码权利要求1所述重组融合蛋白的核酸分子的重组表达载体，转染HEK293细胞后对细胞进行体外培养，从细胞培养液中分离纯化目的蛋白。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述重组表达载体的出发载体为pCAGGS。

7.新冠病毒抗体检测试剂，其特征在于，所述检测试剂中含有权利要求1所述的重组融合蛋白。

8.新冠病毒抗体胶体金检测试纸条，其特征在于，所述试纸条由样品垫、金标垫、NC膜、吸水垫和背板组成；样品垫、金标垫、NC膜和吸水垫依次相互叠加粘贴在背板上，各部分之间相互叠加2±0.5mm；

所述金标垫上包被有重组融合蛋白-胶体金复合物；NC膜上包被有检测线和质控线，所述检测线包被有抗人二抗，所述质控线包被有羊抗鼠二抗；

其中，所述重组融合蛋白为权利要求1所述的重组融合蛋白。

9.根据权利要求8所述的试纸条，其特征在于，所述样品垫为玻璃纤维素材质；和/或

所述金标垫的制备方法包括：每1000微升的胶体金溶液中加入16±0.5微升0.2M K₂CO₃溶液，然后加入20±0.5微克所述重组融合蛋白，室温密闭混匀反应30±5min，加入100微升10%BSA，封闭反应30±5min；然后于4℃ 10000转/分离心20min，弃上清，收集胶体金颗粒沉淀，用30微升PB缓冲液复溶，得到金标溶液；然后按照2μL/cm喷量，将金标溶液均匀喷到金标垫上，在真空干燥箱中，于37℃通风烘干4±0.5h；其中，所述胶体金溶液的浓度为0.01%，胶体金颗粒粒径大小为40±5nm；所述PB缓冲液中含有1% BSA、0.5% PEG20000、2%海藻糖和0.5% Triton X-100；和/或

所述检测线和质控线上包被的抗体浓度为1mg/mL；和/或

所述背板为PVC板。

10.权利要求1所述重组融合蛋白在制备新冠病毒抗体检测试剂、试纸条或试剂盒中的应用。