[发明专利]一种生姜组织培养的方法

权利要求书

1.一种组织培养快速繁殖生姜的方法，其特征在于：是取大小为0.6~0.8cm的生姜茎尖预处理后置于缓释培养基上诱导产生丛生芽，随后在缓释培养基中加入NH₄NO₃浓度减半的MS基础培养基，并补加0.5~1mg/L的PP333 ，持续培养获得带根苗；所述的缓释培养基是由MS基础培养基、6-BA 0.5~1.5mg/L、NAA 缓释生长素2~3mg/L、TDZ 0.25~0.3mg/L，2%蔗糖，琼脂0.55~0.65%组成，并调节pH为5.8~6；所述NAA缓释生长素是将纳米SiO₂分散于去乙醇离子水溶液中，加入NAA，再加入PVP k30，混合后加热至80~90℃保温20~30min，停止加热，冷却至室温，随后过滤、干燥，所述预处理是采用体积浓度为70%的乙醇浸润0.6~0.8cm的生姜茎尖30~40s，然后采用无菌水洗涤，再重复相同的乙醇浸润一次，无菌水洗涤后置于50℃下加热5~8min。

2.如权利要求1所述的一种组织培养快速繁殖生姜的方法，其特征在于：所述纳米SiO₂、NAA和PVP k30的质量比为4~6：1：0.03~0.08。

3.如权利要求1或2所述的一种组织培养快速繁殖生姜的方法，其特征在于：在缓释培养基中加入NH₄NO₃浓度减半的MS基础培养基的同时，按照MS基础培养基的添加量补加2%蔗糖和0.6%的琼脂，NH₄NO₃ 浓度减半的MS基础培养基和缓释培养基的体积比为1:3。

4.如权利要求1所述的一种组织培养快速繁殖生姜的方法，其特征在于：所述培养具体是先在28℃，相对湿度为60~70%下暗室培养至长出白色、绿色的愈伤组织，以及芽苗，待芽苗长到4~5cm时，将芽苗截去上部叶及叶鞘，重新置于培养基中，先在光照强度为1500~1800Lux下持续培养24h，再在无光照环境下培养24h，交替培养得增殖的生根苗。

5.一种组织培养快速繁殖生姜的方法，其特征在于，按如下步骤进行：

预处理：

取大小为0.6~0.8cm的生姜茎尖，用体积浓度为70%的乙醇浸润30~40s，然后采用无菌水洗涤，再重复相同的乙醇浸润一次，无菌水洗涤后置于50℃下热处理5~8min；

接种培养：

（1）将预处理后的生姜茎尖接种于缓释培养基中进行初代培养，所述缓释培养基是由MS基础培养基、6-BA 0.5~1.5mg/L、NAA 缓释生长素2~3mg/L、TDZ 0.25~0.3mg/L，2%蔗糖，琼脂0.55~0.65%组成，并调节pH为5.8~6；其中NAA 缓释生长素是将纳米SiO₂分散于去乙醇离子水溶液中，加入NAA，再加入PVPk30，混合后加热至80~90℃保温20~30min，停止加热，冷却至室温，随后过滤、干燥制得，SiO₂ 、NAA和PVP k30的质量比为4~6：1：0.03~0.08；

（2）在28℃，相对湿度为60 ~ 70%下暗室培养至长出白色、绿色的愈伤组织，以及芽苗，待芽苗长到4~5cm时，将芽苗截去上部叶及叶鞘，重新置于培养基中，并向培养基中加入补充了0.2%蔗糖和0.6%的琼脂、且NH₄NO₃浓度减半的MS基础培养基，并补加0.5~1mg/L的PP333，MS基础培养基和缓释培养基的体积比为1:3，保持相同温度和湿度，先在光照强度为1500~1800Lux下持续培养24h，再在无光照环境下培养24h的交替培养方式培养得增殖的生根苗。