[发明专利]一种生姜组织培养的方法

说明书

一种组织培养快速繁殖生姜的方法，其特征在于：是取生姜茎尖预处理后置于缓释培养基上诱导产生丛生芽，随后在缓释培养基中加入NH₄NO₃浓度减半的MS基础培养基，并补加0.5~1mg/L的PP₃₃₃，持续培养获得带根苗；所述的缓释培养基是MS基础培养基中补充6‑BA 0.5~1.5mg/L、NAA缓释生长素2~3mg/L、TDZ 0.25~0.3mg/L，2%蔗糖，琼脂0.55~0.65%，调节pH为5.8~6。本发明通简化了组织培养步骤，缩短了培养时间，提高了芽苗成活率和脱毒率，成活率达到96%，脱毒率达到100%，同时防止了生姜组织培养过程中产生变异，增殖系数显著提高，达到5.13，生根率达到97.7%，培育健壮的生姜带根苗。

技术领域

本发明涉及组织培养技术领域，具体涉及一种生姜组织培养的方法。

背景技术

生姜是一种一年生活多年生的姜科姜属升温宿根草本植物，是我国许多地区种植业的主要来源。生姜是药食两用的经济植物，具有发汗解表、温中止呕，温肺止咳、解鱼蟹毒等作用。中国是生姜的发源地及主要出产国之一，距今已有两千多年的栽培历史。传统的生姜生产是在收获季节选健壮、无病虫害的根茎窖藏，次年取已萌芽的种姜切块种植，这种方式存在严重的浪费，需要的人力物力多，而且，由于生姜不开花或很少开花，只能采用无性繁殖，长期的无性繁殖，导致病毒的病害的积累与传播(如黄瓜花叶病毒、细菌性枯萎病、镰刀霉菌及根节线虫)，导致生姜大量减产，生姜品质退化，抗逆性下降，在国内，大量报道集中在有青枯假单胞杆菌引起的姜瘟病上，尤其是在生姜主产区，长年连作栽培，田间发病率严重时高达70～80％，感染了病毒的生姜品质差，叶子皱缩，生长缓慢，一般减产30～80％，甚至绝收，这成为了生姜创高产、获得高效益的主要阻碍。采用茎尖组织培养技术获得脱毒苗可以降低病毒的影响。

在茎尖培养过程的关键在于既要保证优异的脱毒效果，又要满足诱导成苗率高。但是，现有的组织培养并不适用于生姜的组织培养，很难诱导其产生愈伤组织和丛生芽，繁殖缓慢，愈伤组织容易褐变，诱导成活率低，容易烂苗，而且繁琐的培养过程中容易发生变异问题，从而造成生姜组织培养方面存在这繁殖系数低，生根率低、易产生畸形苗等问题。

发明内容

鉴于此，本发明目的在于提供一种生姜组织培养的方法。该方法简化了组织培养步骤，诱导成活率高、提高了生姜的繁殖系数，脱毒率达到100％。

本发明目的通过如下技术方案实现：

一种组织培养快速繁殖生姜的方法，其特征在于：是取大小为0.6～0.8cm的生姜茎尖预处理后置于缓释培养基上诱导产生丛生芽，随后在缓释培养基中加入NH₄NO₃浓度减半的MS基础培养基，并补加0.5～1mg/L的PP333，持续培养获得带根苗。

所述的缓释培养基是MS基础培养基中补充6-BA 0.5～1.5mg/L、NAA缓释生长素2～3mg/L、TDZ 0.25～0.3mg/L，2％蔗糖，琼脂0.55～0.65％，调节pH为5.8～6。

TDZ具有类细胞分裂素的作用，其分子中有两个功能基团：苯基和噻二唑，在诱导反应中，两个环状基团起到相互促进作用，诱导愈伤组织生长速率是其他生长调节剂的几十倍，因此，培养基中0.25～0.3mg/L低浓度的TDZ具有快速启动愈伤组织生长的作用，另一方面TDZ的存在，抑制了生姜茎尖中细胞分裂素氧化酶的活性(能够使细胞分裂素不可逆转失活的唯一的酶)，保证了6-BA 在组织培养过程中保持其高效活性。