[发明专利]一种含羟脯氨酸修饰化的重组人III型胶原蛋白成熟肽及其制备方法与应用有效
| 申请号： | 202110029993.5 | 申请日： | 2021-01-11 |
| 公开（公告）号： | CN112626074B | 公开（公告）日： | 2021-11-23 |
| 发明（设计）人： | 黄亚东;张齐;肖巧学;杨艳;周帅印;赵文;谢伟权 | 申请（专利权）人： | 肽源（广州）生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/12 | 分类号： | C12N15/12;C12N15/81;C12N1/19;C07K14/78;A61L26/00;C12R1/84 |
| 代理公司： | 佛山市君创知识产权代理事务所(普通合伙) 44675 | 代理人： | 许菲菲 |
| 地址： | 511447 广东省广州市番禺*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 羟脯氨酸 修饰 重组 iii 胶原 蛋白 成熟 及其 制备 方法 应用 | ||
本发明涉及生物基因工程重组技术领域，特别涉及一种含羟脯氨酸修饰化的重组人III型胶原蛋白成熟肽及其制备方法与应用。本发明提供了一种编码重组人III型胶原蛋白成熟肽的基因，并将脯氨酸羟化酶表达载体pPZAStA‑P4HA2‑P4HB2与上述编码重组人III型胶原蛋白成熟肽的基因的核苷酸序列连接得到重组载体转入酵母表达系统中，得到可表达含羟脯氨酸修饰化的重组人III型胶原蛋白成熟肽的酵母，利用该酵母表达含羟脯氨酸修饰化的重组人III型胶原蛋白成熟肽，该重组人III型胶原蛋白成熟肽分子量大，表达水平高，更接近天然胶原蛋白，表现出了良好的生物学活性。
技术领域
本发明涉及生物基因工程重组技术领域，特别涉及一种含羟脯氨酸修饰化的重组人III型胶原蛋白成熟肽及其制备方法与应用。
背景技术
胶原蛋白是脊椎动物的主要结构蛋白，约占总蛋白的30％。人类肌腱、软骨以及皮肤中超过一半的细胞外基质蛋白均由胶原蛋白组成。胶原蛋白对细胞起着保护、营养、运输等作用。人体皮肤中的胶原蛋白主要以I型与III型为主，其中III型胶原蛋白含量会随着年龄增长逐渐减少，与皮肤衰老关系密切。
胶原蛋白亚基的分子量一般在120kDa左右，远大于一般的生物活性蛋白的亚基，氨基酸序列中含有大量的Gly-X-Y(X、Y代表氨基酸，其中Y多为脯氨酸)重复，并且，存在一定比例的羟脯氨酸。羟脯氨酸对维持胶原蛋白的三股螺旋结构以及生物特性有着重要的作用。目前，市售胶原的获取方法主要有两种，一种来源于动物组织提取胶原，另一种是依靠基因工程技术通过生物发酵法获取的重组胶原蛋白或其结构类似物。二者的特点如表1。
表1重组人源胶原蛋白与动物提取胶原蛋白的特点比较
对比项目 动物组织提取胶原蛋白 重组胶原蛋白及其类似物 生产过程 猪牛等来源动物组织水解 生物发酵法生产 组成成分 各种结构混杂，杂质多 结构清晰，杂质少 病毒风险 各种动物源病毒，风险高 不含动物源成分，安全 排异过敏反应 有 低 水溶性 低 高 生物活性 低 高
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