[发明专利]一种利用光点击生物正交反应的寨卡病毒可视化标记策略有效
申请号: | 202110031478.0 | 申请日: | 2021-01-11 |
公开(公告)号: | CN112611742B | 公开(公告)日: | 2022-12-06 |
发明(设计)人: | 伍启康;廖玉辉;李志嘉;肖铿;郑举敦 | 申请(专利权)人: | 佛山市第一人民医院(中山大学附属佛山医院);南方医科大学皮肤病医院(广东省皮肤病医院;广东省皮肤性病防治中心;中国麻风防治研究中心) |
主分类号: | G01N21/64 | 分类号: | G01N21/64 |
代理公司: | 广州凯东知识产权代理有限公司 44259 | 代理人: | 姚迎新 |
地址: | 528000 *** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 利用 点击 生物 正交 反应 病毒 可视化 标记 策略 | ||
1.一种利用光点击生物正交反应的寨卡病毒可视化标记策略,其特征在于:
步骤是:
先将9,10-菲醌官能化到寨卡病毒中,操作包括:11 mg 9,10-菲醌,分散于10 ml MES缓冲液中;加入80 mg EDC和120 mg NHS,超声作用,封口,振荡;然后将浓度为2 mg/ml的寨卡病毒100 μL分散在10 ml PBS中,加入上述MES缓冲液,振荡;
将乙烯基醚官能化到量子点中,操作包括:取摩尔浓度为8×10-6 μM含氨基的量子点1μL,再取含羧基的乙烯基醚1000 μL,EDCI 15.3 mg,4-二甲胺基吡啶9.8 mg,加入5 ml二氯甲烷完全溶解;室温黑暗环境中摇动;
然后,在照射下通过环化反应将寨卡病毒标记为荧光量子点,操作包括:将9,10-菲醌基修饰的寨卡病毒和乙烯基醚基修饰的量子点溶解在CH3CN和PBS混合溶液中,然后用LED灯照射1min进行环化反应将寨卡病毒标记为荧光量子点,得到量子点修饰的寨卡病毒ZIKV-Qds。
2.根据权利要求1所述的一种利用光点击生物正交反应的寨卡病毒可视化标记策略,其特征在于:
所述将9,10-菲醌官能化到寨卡病毒中的详细操作包括:11 mg 9,10-菲醌,分散于10ml MES缓冲液中;加入80 mg EDC和120 mg NHS,超声作用15s,封口,37℃振荡15 min;然后将浓度为2 mg/ml的寨卡病毒100 μL分散在10 ml PBS中,加入上述MES缓冲液,37℃振荡过夜,经NAP-5脱盐柱净化,得到9,10-菲醌修饰的寨卡病毒。
3.根据权利要求1所述的一种利用光点击生物正交反应的寨卡病毒可视化标记策略,其特征在于:
所述将乙烯基醚官能化到量子点中的操作包括:取摩尔浓度为8×10-6μM含氨基的量子点1 μL,再取含羧基的乙烯基醚1000 μL,EDCI 15.3 mg,4-二甲胺基吡啶9.8 mg,分别放入三颈烧瓶中,加入5 ml二氯甲烷完全溶解;然后在室温黑暗环境中摇动2小时;然后通过硅胶柱层析得到乙烯基醚基修饰的量子点。
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