[发明专利]一种利用高效液相电感耦合等离子体质谱测定硒形态的方法

权利要求书

1.一种利用高效液相电感耦合等离子体质谱测定硒形态的方法，其特征在于所述方法包括以下步骤：

(1)流动相制备：将铵盐溶液及色谱纯甲醇配制成甲醇-柠檬酸铵缓冲液并调节pH值；使用0.22μm滤膜对流动相进行抽滤，超声脱气，得到流动相；

(2)采用高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱联用对标准硒形态溶液和待测提取提取液进行测定；

(3)采用归一化法对样品中硒代胱氨酸、硒代蛋氨酸、甲基硒代半胱氨酸、亚硒酸根以及硒酸根五种硒形态进行定量分析。

2.如权利要求1所述的测定硒形态的方法，其特征在于，步骤(1)中，所述铵盐选自柠檬酸二铵、磷酸氢二胺和柠檬酸铵中的一种。

3.如权利要求1所述的测定硒形态的方法，其特征在于，步骤(1)中，所述色谱纯甲醇为经过-20℃冷冻的色谱纯甲醇。

4.如权利要求1所述的测定硒形态的方法，其特征在于，步骤(1)中，所述流动相中甲醇的体积浓度为2-10％。

5.如权利要求1所述的测定硒形态的方法，其特征在于，步骤(1)中，所述流动相中铵盐溶液的浓度为2-10mmol/L。

6.如权利要求1所述的测定硒形态的方法，其特征在于，步骤(1)中，所述流动相的pH值为5-6。

7.如权利要求1所述的测定硒形态的方法，其特征在于，步骤(1)中，所述超声脱气的时间为15±5min。

8.如权利要求1所述的测定硒形态的方法，其特征在于，步骤(2)中，所述标准硒形态溶液包括硒代胱氨酸、硒代蛋氨酸、甲基硒代半胱氨酸、亚硒酸根以及硒酸根五种硒形态标准样品储备液，其中每种硒形态标准样品储备液以硒计的浓度为1000mg/mL。

9.如权利要求1所述的测定硒形态的方法，其特征在于，步骤(3)具体包括：根据HPLC-ICP-MS联用检测样品中各组分的量与其峰面积成正比的特性，且样品中所有组分都能产生信号得到相应的色谱峰，由此用归一化公式(1)计算各组分的含量：

其中：设试样分组共n，各组含量分别为m₁，m₂，……，m_n。

10.如权利要求9所述的测定硒形态的方法，其特征在于，步骤(3)中，使用归一化法对样品进行定量分析时，所有标准样品配置需以硒计算浓度，并且满足所有硒形态成分都洗脱并且在检测器有响应且所有硒形态成分相同硒浓度的情况下峰面积相同。