[发明专利]一种眼内液细胞因子检测试剂、检测方法及应用

说明书

本申请涉及疾病辅助诊断技术领域，具体公开了一种眼内液细胞因子检测试剂、检测方法及应用。检测试剂包括检测眼内液中的Eotaxin、IL‑10、IL‑12p70、IL‑1β、IL‑2、IL‑5、IL‑6、IL‑8、MCP‑1、TNF、IFN‑γ、VEGF、IL‑17a、ICAM‑1、VCAM‑1、TGF‑β1和bFGF的试剂中的至少两种。检测方法包括如下步骤：步骤一：将眼内液样本和微球溶液混合均匀；步骤二：将预混样本和抗体溶液混合均匀；步骤三：通过流式细胞仪对待测样本进行荧光检测。本申请通过对以上十七种细胞因子进行筛选组合，可满足眼科疾病辅助诊断和分型的需求。

技术领域

本申请涉及疾病辅助诊断技术的领域，更具体的说，它涉及一种眼内液细胞因子检测试剂、检测方法及应用。

背景技术

细胞因子是由免疫细胞和某些非免疫细胞经刺激而合成、分泌的一类具有广泛生物学活性的小分子蛋白质，是细胞之间发生交互作用的重要介质。许多细胞因子的交互作用构成细胞因子网络，其特征为其多效性和交叠性。多效性是指一种细胞因子可能具有许多不同的功能，而交叠性是指某些细胞因子具有共同的活性。

细胞因子含量的变化可以辅助疾病的诊断和分型，故细胞因子检测是常用的检测手段之一。例如：眼内液检测是眼科疾病诊断的一种手段，通过检测眼内液中的微量细胞因子，特异性地反应眼内环境，为医生对疾病做出准确判断和针对性地治疗提供了依据。

眼内液是眼球内液体的总称，包括房水、玻璃体液、视网膜下液等，其中房水最容易获取，是最主要的检测对象。房水总量通常仅在0.2ml左右，样本量要远少于血清样本。

针对眼内液细胞因子检测方面，目前存在细胞因子组合难以搭配的问题，难以实现眼科疾病的辅助诊断和分型。

发明内容

为了辅助眼科疾病诊断和分型，本申请提供一种眼内液细胞因子检测试剂、检测方法及应用。

第一方面，本申请提供一种眼内液细胞因子检测试剂，采用如下技术方案：

一种眼内液细胞因子检测试剂，检测试剂包括检测眼内液中的Eotaxin、IL-10、IL-12p70、IL-1β、IL-2、IL-5、IL-6、IL-8、MCP-1、TNF、IFN-γ、VEGF、IL-17a、ICAM-1、VCAM-1、TGF-β1和bFGF的试剂中的至少两种。

通过采用上述技术方案，Eotaxin有助于嗜酸性粒细胞募集到响应寄生虫感染以及过敏性和自身免疫性疾病的炎症部位。

IL-10是一种多效性细胞因子，可以在多种类型细胞中发挥免疫抑制或免疫刺激的作用。

IL-12p70促进 Th1细胞的生成和细胞免疫应答， 抑制 Th2 细胞的生成， 刺激多种细胞因子的分泌尤其是 IFN-γ，并且可增强NK细胞、巨噬细胞和CTL细胞的杀瘤效应，通过间接作用抗肿瘤血管生成，增强机体抗肿瘤免疫反应。

IL-1β发挥免疫调节作用，主要由先天性免疫细胞在炎性损伤中表达。

IL-2又称T细胞生长因子，能增强NK细胞和LAK细胞的杀伤活性。

IL-5能促进B细胞增殖分化，诱导B细胞发生lg类别转换，产生lgA类抗体刺激T细胞增殖分化。

IL-6在感染和组织损伤的反应中迅速而短暂地产生，通过刺激急性期反应、造血和免疫反应促进宿主防御，失调的IL-6持续合成对慢性炎症和自身免疫具有病理学作用。

IL-8是趋化性细胞因子,可以促进炎症细胞趋化和诱导细胞增殖,并在癌组中高表达。

MCP-1 是调节单核细胞/巨噬细胞迁移和浸润的关键趋化因子之一。TNF感染时能激活中性粒细胞和巨噬细胞成熟活化，导致炎症；参与机体抗肿瘤免疫反应。