[发明专利]一种用于检测血管通透性的产品及其制备方法

权利要求书

1.TRAF2和/或ARPC4基因在制备用于检测血管通透性产品中的应用。

2.根据权利要求1所述应用，其特征在于：所述产品为检测试剂、检测试纸、试剂盒中的一种。

3.一种用于检测血管通透性的产品，其特征在于：利用TRAF2和/或ARPC4基因制备而成。

4.根据权利要求3所述的用于检测血管通透性的产品，其特征在于：含有TRAF2和/或ARPC4基因结合位点。

5.根据权利要求3所述的用于检测血管通透性的产品，其特征在于：所述产品为检测试纸。

6.根据权利要求5所述的用于检测血管通透性的产品，其特征在于：检测试纸的制备包括如下步骤：

进行ARPC4和/或TRAF2蛋白质的合成，得到蛋白质产物，将合成的蛋白质注射到小鼠体内，合成克隆抗体；

将得到的克隆抗体进行ELISA实验筛选，将一种抗体固定在ELISA底板上，作为反应1抗，加入患有与血管通透性改变相关疾病的人的血清样本；将另一种抗体结合免疫荧光酶，并作为二抗加入到反应中，检测荧光反应，挑选出荧光反应最大的抗体；

胶体金标记物的制备：取胶体金，加入碳酸钾溶液，混匀，加入筛选出的抗体，混匀，静置，再加入封闭液，混匀静置，静置后离心，弃上清，用胶体金复溶液将沉淀复溶，充分混匀，所得溶液即为胶体金标记物；

胶体金试纸制备：将玻璃纤维膜裁成所需大小，将样品垫置于胶体金标记物中，使其充分吸收。然后用吹风机将样品垫均匀吹干，制备成金标垫，依次贴硝酸纤维素膜、金标垫、样品垫、吸水纸，组装完成后剪成所需大小，放入容器内。

7.一种筛选用于检测毛细血管通透性的靶基因的方法，其特征在于：包括如下步骤：

(1)选择与血管通透性变化相关的疾病；

(2)分别对患有所述与血管通透性变化相关的疾病病人和正常人进行血小板转录组测序，获得疾病和正常样本的血小板基因表达量；

(3)以正常样本基因表达量作为对照，对与血管通透性变化相关的疾病的基因进行表达差异统计，筛选出基因表达倍数为|Log2FC|＞2且P_value＜0.05的差异基因；

(4)将筛选出的所述差异基因进行KEGG数据库比对，获得差异基因富集的通路；

(5)在疾病所述富集通路中，选出与膜转运调控相关的代谢途径，并从选出的代谢途径中挑选出差异基因；随后按如下(6-1)～(8-1)进行，或者按如下(6-2)～(8-2)进行；

(6-1)从步骤(5)的差异基因中，利用蛋白互作分析和受试者操作特征分析进一步筛选出具有预后意义的特征基因并作为预选靶基因；

(7-1)对预选靶基因进行扩增验证，并计算在疾病样本与正常样本中的拷贝倍数；

(8-1)从步骤(7-1)中进行的预选靶基因中，挑选出表达差异倍数最大的基因，即为所需靶基因；

(6-2)从步骤(5)的差异基因中，选择与血管通透性变化呈正相关的疾病和与血管通透性变化呈负相关的疾病共有的基因，作为预选靶基因；

(7-2)对预选靶基因分别在与血管通透性变化呈正相关的疾病中、在与血管通透性变化呈负相关的疾病中及正常样本中进行表达，并统计各预选靶基因的表达量；

(8-2)选出在与血管通透性变化呈正相关的疾病中表达量高于在正常样本中的表达量，且在与血管通透性变化呈负相关的疾病中表达量高于在正常样本中的表达量的预选靶基因，即为所需靶基因。

8.根据权利要求7所述筛选用于检测毛细血管通透性的靶基因的方法，其特征在于：所述与血管通透性变化相关的疾病为动脉粥样硬化，和/或，易栓症，和/或，紫癜。

9.根据权利要求8所述筛选用于检测毛细血管通透性的靶基因的方法，其特征在于：所述与血管通透性变化相关的疾病为易栓症和紫癜。

10.根据权利要求9所述筛选用于检测毛细血管通透性的靶基因的方法，其特征在于：所述与血管通透性变化相关的疾病为动脉粥样硬化时，进行步骤(6-1)～(8-1)；和/或，所述与血管通透性变化相关的疾病为易栓症和紫癜时，进行步骤(6-2)～(8-2)。