[发明专利]一种用于检测血管通透性的产品及其制备方法

说明书

本发明属于分子生物学领域，具体涉及一种用于检测血管通透性的产品及其制备方法。具体技术方案为：利用ARPC4和/或TRAF2或基因制备的检测用产品。本发明使用分子生物学技术，筛选出一种与血管通透性相关度高的靶基因。本领域技术人员可以利用业内常规技术制备出系列可用于检测血管通透性的试剂、试纸等相同产品。利用本发明提供的靶基因及制备的检测用产品，可及时、快速、准确判断血管通透性是否发生改变。

技术领域

本发明属于分子生物学领域，具体涉及一种用于检测血管通透性的产品及其制备方法。

背景技术

血管是血液循环系统的重要组成部分。血液循环的完成离不开血管在组织中进行的血液与组织物质交换。血管通透性指物质穿过毛细血管壁的能力。

血管的通透性受到血管壁结构的影响。通常情况下，血管壁能够阻挡大分子通过血管壁。但当发生炎症、烧伤、休克、免疫反应、肿瘤转移等一系列病理过程时，血管壁通透性会发生改变。因此，及时、快速、准确检测血管通透性，对预先发现某些疾病、确诊某些疾病均具有重要意义。

现有检测血管通透性的方法往往依赖于炎症病理过程的发生，以及对尿蛋白的检测，即依赖于血管通透性已经改变甚至已经出现症状的“事后”指标，并不能够及时有效地对血管通透性的改变做出预先判断。

因此，如果能提供一种可对血管通透性改变做出快速、准确判断的产品，将具有重要的科研价值和现实意义。

发明内容

本发明的目的是提供一种用于检测血管通透性的产品及其制备方法。

为实现上述发明目的，本发明所采用的技术方案是：TRAF2和/或ARPC4基因在制备用于检测血管通透性产品中的应用。

优选的，所述产品为检测试剂、检测试纸、试剂盒中的一种。

相应的，一种用于检测血管通透性的产品，利用TRAF2和/或ARPC4基因制备而成。

优选的，含有TRAF2和/或ARPC4基因结合位点。

优选的，所述产品为检测试纸。

优选的，检测试纸的制备包括如下步骤：

进行ARPC4和/或TRAF2蛋白质的合成，得到蛋白质产物，将合成的蛋白质注射到小鼠体内，合成克隆抗体；

将得到的克隆抗体进行ELISA实验筛选，将一种抗体固定在ELISA底板上，作为反应1抗，加入患有与血管通透性改变相关疾病的人的血清样本；将另一种抗体结合免疫荧光酶，并作为二抗加入到反应中，检测荧光反应，挑选出荧光反应最大的抗体；

胶体金标记物的制备：取胶体金，加入碳酸钾溶液，混匀，加入筛选出的抗体，混匀，静置，再加入封闭液，混匀静置，静置后离心，弃上清，用胶体金复溶液将沉淀复溶，充分混匀，所得溶液即为胶体金标记物；

胶体金试纸制备：将玻璃纤维膜裁成所需大小，将样品垫置于胶体金标记物中，使其充分吸收。然后用吹风机将样品垫均匀吹干，制备成金标垫，依次贴硝酸纤维素膜、金标垫、样品垫、吸水纸，组装完成后剪成所需大小，放入容器内。

相应的，一种筛选用于检测毛细血管通透性的靶基因的方法，包括如下步骤：

(1)选择与血管通透性变化相关的疾病；

(2)分别对患有所述与血管通透性变化相关的疾病病人和正常人进行血小板转录组测序，获得疾病和正常样本的血小板基因表达量；

(3)以正常样本基因表达量作为对照，对与血管通透性变化相关的疾病的基因进行表达差异统计，筛选出基因表达倍数为|Log2FC|＞2且P_value＜0.05的差异基因；

(4)将筛选出的所述差异基因进行KEGG数据库比对，获得差异基因富集的通路；