[发明专利]靶向CD7的工程化免疫细胞、嵌合抗原受体、CD7阻断分子及应用

说明书

本发明涉及一种靶向CD7的工程化免疫细胞、嵌合抗原受体、CD7阻断分子及应用。本发明利用人源CD7的天然配体取代抗体序列作为CD7特异性CAR‑T或CAR‑NK细胞的抗原识别域。在CD7特异性CAR中使用人源CD7作为抗原识别域的优点是可以防止宿主产生的细胞和体液反应，从而实现CAR‑T细胞的长期持久性和更好的疗效。

技术领域

本发明涉及细胞免疫治疗技术领域，具体地，涉及靶向CD7的免疫治疗方法，尤其是一种靶向CD7的工程化免疫细胞、嵌合抗原受体、CD7阻断分子及应用。

背景技术

T细胞恶性肿瘤是一组异质性很强的克隆性生长和T细胞功能障碍性疾病，主要分为T细胞淋巴瘤(T-cell lymphomas，TCLs)和T细胞白血病，具有成熟和前体亚型。这类疾病代表了一类极其恶性的血液系统癌症，在儿童和成人中复发率和死亡率都很高，目前还没有有效或针对性的治疗方法。尽管现有技术中已经有多种的化疗方案，在患有T细胞急性淋巴细胞白血病(T-cell acute lymphoblastic leukemia，T-ALL)的病患中，只有不到50％的成人和75％的儿童能够存活5年以上。对于初次治疗后复发的患者，挽救性化疗方案只是对20％-40％的病例能够起到诱导缓解效果。在复发或化疗难治性T细胞恶性肿瘤患者中，治疗预后较差，而有效且可耐受的治疗方法有限。对于10-50％在挽救性化疗后获得完全缓解(CR)的患者，唯一的治疗选择仍然是异基因干细胞移植(allogeneic stem celltransplantation，ASCT)。然而，ASCT的治愈率仍保持在30％或更低，而且并非所有CR患者都有资格接受移植。其他T细胞恶性肿瘤，包括皮肤和外周T细胞淋巴瘤(分别为CTCL和PTCL)对化疗的初始反应率更低，即使在有反应的患者中，无进展生存率仍保持在40–50％。因此，尽管在治疗T细胞恶性肿瘤方面取得了进展，但是仍然需要新的、有针对性的治疗方案来改善预后，特别是对于复发和难治的患者。除了T细胞恶性肿瘤，如T-ALL和T-NHL，必须认识到还有其他CD7+血液恶性肿瘤仍然缺乏有效治疗和靶向治疗方案，如20％-30％的急性髓性白血病(AML)，以及绝大部分的NK和NKT淋巴瘤。

嵌合抗原受体T(CAR-T)细胞是最有前途的肿瘤免疫治疗方法之一，对B淋巴细胞恶性肿瘤患者能够产生显著的应答率。因此，以CD19(一种在B细胞白血病和淋巴瘤中广泛表达的抗原)为靶点的CAR-T细胞已成为首个获得许可的癌症T细胞疗法。CD19 CAR-T细胞在治疗复发性和难治性B细胞恶性肿瘤方面的成功使其在其他肿瘤中的应用更加广泛。鉴于B淋巴细胞和T淋巴细胞恶性肿瘤之间的相似性，将CAR-T细胞治疗扩展到这些疾病似乎很简单。然而，针对T细胞恶性肿瘤的CAR-T细胞治疗已被证明很难开发和实施。这主要是由于在工程化T细胞上同时表达靶抗原可导致CAR-T细胞在制备过程中自相残杀；同时，CAR-T细胞回输后正常外周血T细胞的清除可导致严重的免疫缺陷。

CD7是一种跨膜糖蛋白，通常表达在大多数外周血T细胞和NK细胞(NK细胞即自然杀伤细胞，来源于骨髓淋巴样干细胞，其分化发育依赖于骨髓及胸腺微环境，主要分布于骨髓、外周血、肝、脾、肺和淋巴结；NK细胞不同于T、B细胞，是一类无需预先致敏就能非特异性杀伤肿瘤细胞和病毒感染细胞的淋巴细胞)及其前体细胞上，作为一种辅助T细胞活化和与其他免疫亚群相互作用的共刺激蛋白。95％以上的淋巴母细胞性白血病和淋巴瘤以及部分外周T细胞淋巴瘤表达CD7。在小鼠动物模型中，缺乏CD7的T细胞在很大程度上表现出不受干扰的发育、稳态和保护功能。由于CD7对外周血T细胞功能没有显著的影响，因此它是一个很有前途的CAR-T细胞治疗靶标。CD7曾被作为单克隆抗体(mAb)的靶标采用免疫毒素治疗T细胞恶性肿瘤患者进行过评估。这种单克隆抗体的偶联物没有产生严重的CD7相关的毒副作用，但抗肿瘤反应不显著，这可能是由于鼠源抗体在患者治疗上的有限活性所致。

现有技术中，关于靶向CD7的治疗研究进展如下：