[发明专利]一种全细胞催化生产PAPS的方法有效
| 申请号： | 202110039525.6 | 申请日： | 2021-01-13 |
| 公开（公告）号： | CN112625995B | 公开（公告）日： | 2023-07-04 |
| 发明（设计）人： | 刘立明;刘开放;梁光杰;高聪;刘佳;陈修来;宋伟 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12N15/54;C12N15/55;C12P19/32;C12R1/19 |
| 代理公司： | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人： | 林娟 |
| 地址： | 214000 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 细胞 催化 生产 paps 方法 | ||
1. 一种重组菌，其特征在于，在大肠杆菌利用pETDuet-1载体表达腺嘌呤核苷三磷酸硫化酶和5’-磷酸腺苷硫酸激酶，并利用pRSFDuet-1载体表达无机焦磷酸水解酶、多聚磷酸激酶；所述腺嘌呤核苷三磷酸硫化酶的编码基因ATPS的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；所述5’-磷酸腺苷硫酸激酶的编码基因APSK的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示；所述无机焦磷酸水解酶的编码基因PPA的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示；所述多聚磷酸激酶的编码基因PPK的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示。
2.一种生产3’-磷酸腺苷-5’-磷酰硫酸的方法，其特征在于，以ATP为底物，利用权利要求1所述的重组菌全细胞转化生产3’-磷酸腺苷-5’-磷酰硫酸；底物浓度为40-80 mM，温度为30-45℃。
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述重组菌以15-30g/L的量加入转化体系中。
4. 一种生产3’-磷酸腺苷-5’-磷酰硫酸的方法，其特征在于，以ATP为底物，利用权利要求1所述的重组菌全细胞在30℃~45℃转化生产3’-磷酸腺苷-5’-磷酰硫酸；底物浓度为10-20 mM。
5. 根据权利要求4所述的方法，其特征在于，在反应过程中补料ATP 50-60mM。
6.权利要求1所述重组菌，或权利要求2-5任一所述方法在制备3’-磷酸腺苷-5’-磷酰硫酸中的应用。
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