[发明专利]一种稳定检测黄曲霉毒素含量的方法有效
申请号: | 202110039925.7 | 申请日: | 2021-01-13 |
公开(公告)号: | CN112881697B | 公开(公告)日: | 2021-11-02 |
发明(设计)人: | 刘龙飞;卜庆婧 | 申请(专利权)人: | 北京中检葆泰生物技术有限公司 |
主分类号: | G01N33/577 | 分类号: | G01N33/577;G01N33/558;G01N33/531;G01N33/53;G06F17/16 |
代理公司: | 北京蕙识同联专利代理事务所(特殊普通合伙) 11966 | 代理人: | 赵雪;樊颖 |
地址: | 100068 北京市大兴区北京*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 稳定 检测 黄曲霉 毒素 含量 方法 | ||
1.一种稳定检测黄曲霉毒素含量的方法,其特征在于,包括以下步骤:
a)移取处理后的样品液至试纸条的样品垫;
b)将试纸条放入孵育器;
c)将孵育器在45-50℃的温度下孵育;
d)取出试纸条,并将其放入对应的读数仪中读取结果;
还包括:
步骤1理论光反射度测算;
步骤2标准曲线矩阵的构建;
步骤3样品中黄曲霉毒素的测算;
所述步骤1具体包括:
步骤1.1实际光反射度的测算
用读数仪分别测定T1线、T2线和C线上各128个位点的光反射度,根据T1线、T2线和C线上128个位点的光反射度测算出实际光反射度,实际光反射度的测算公式如下:
式中,I实际为实际光反射度,IC为C线上位点的光反射度,IT1为T1线上位点的光反射度,IT2为T2线上位点的光反射度;
步骤1.2光补偿校正因子获得
利用读数仪测得光补偿校正系数fFn和pFn,进而计算得到光补偿校正因子Dn,所述读数仪内有由7个光源组成的复合光源,所述光补偿校正因子Dn的计算公式如下:
Dn=fFn+pFn
式中,Dn为光补偿校正因子,fFn为由直射光反射偏差造成的光补偿校正系数,pFn为由散射光反射偏差造成的光补偿校正系数,n=1,2,……,7;
步骤1.3理论光反射度测算
所述理论光反射度的测算公式如下:
式中,I理论为理论光反射度;
所述步骤2具体包括:
标准曲线矩阵的构建包括建立多组标准曲线,采用HPLC-MS/MS检测不同基质类型、不同黄曲霉毒素浓度的实际样品,同时采用如权利要求5所述的试纸条检测相同的样品,并采用读数仪测算理论光反射度,根据获得的理论光反射度和黄曲霉毒素的浓度,构建如下所示标准曲线矩阵:
式中:C为用于制作标准曲线的样品中黄曲霉毒素的含量,I为理论光反射度,I的单位为坎德拉,A为校准系数,B为常数矩阵,i为样品种类,j为样品浓度;
所述步骤3具体包括:
样品中黄曲霉毒素的测算,包括标准曲线的校准系数,根据标准曲线矩阵,可获得标准曲线的校准系数Aij和标准曲线的常数矩阵Bij;
Y=I×ΣAij+ΣBij
式中,Y为待测样品中黄曲霉毒素的浓度,I为待测样品的理论光反射度,A为由标准曲线矩阵计算获得的校准系数,B为由标准曲线矩阵计算获得的常数矩阵。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述孵育器的温度为50℃。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述样品为中药样品。
4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述样品为中药材、饮片或中药制剂。
5.根据权利要求1-4任一项所述的方法,其特征在于,所述中药样品在检测前经过如下处理:
e)称取粉末样品至离心管中,加入甲醇,振荡;
f)室温下离心;
g)取上清液至干净离心管中,干燥;
h)加入去离子水涡旋,再加入氯仿振荡,室温下离心;
i)取下层氯仿液至离心管中,干燥,加入烷烃涡旋,再加入磷酸盐缓冲液涡旋,室温下离心,取下层液,即得。
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