[发明专利]一种麦麸阿拉伯木聚糖的荧光标记方法及其制备在审
申请号: | 202110045504.5 | 申请日: | 2021-01-14 |
公开(公告)号: | CN114764063A | 公开(公告)日: | 2022-07-19 |
发明(设计)人: | 郭庆彬;肖猛;刘妍 | 申请(专利权)人: | 天津科技大学 |
主分类号: | G01N21/64 | 分类号: | G01N21/64;C08B37/14 |
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地址: | 300457 天津市滨*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 麦麸 阿拉伯 聚糖 荧光 标记 方法 及其 制备 | ||
1.一种荧光标记阿拉伯木聚糖的方法,其特征在于,所述荧光标记阿拉伯木聚糖由阿拉伯木聚糖共价偶联荧光染料形成,所述染料结构如下:
2.根据权利要求1所述荧光标记阿拉伯木聚糖方法,其特征在于,阿拉伯木聚糖溶于PBS溶液,与酪胺和氰基硼氢化钠反应,获得阿拉伯木聚糖-酪胺复合物,复合物与异硫氰酸荧光素(FITC)反应,冷冻干燥得到荧光标记阿拉伯木聚糖(ATF)。
3.一种制备权利要求1-2任一项所述的荧光标记阿拉伯木聚糖的方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)首先将阿拉伯木聚糖溶解于0.1-0.3M PBS溶液中,依次加入3.5-4.0g酪胺和1.5-2.0g氰基硼氢化钠,室温下连续搅拌反应3-5天;
(2)混合物中加入2倍体积的无水乙醇,在3500-4000r/min条件下离心15-20min。
(3)无水乙醇洗涤沉淀物数次以排除游离酪胺,在蒸馏水中透析数天后,冻干得到阿拉伯木聚糖-酪胺复合物(AT);
(4)将步骤(3)所得复合物溶于蒸馏水中,用1.0-1.5M碳酸氢钠调节溶液pH>8,在25℃条件下加入FITC(0、25、50、100mg),避光反应过夜;
(5)用无水乙醇洗涤沉淀共轭物数次,并在蒸馏水透析数天后,冷冻干燥得到荧光标记阿拉伯木聚糖(ATF-0、ATF-1、ATF-2、ATF-3)。
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