[发明专利]一种鉴定茎用芥菜oxa细胞质雄性不育恢复基因的分子标记及其应用

权利要求书

1.BjGDI-F/R和CRY3-F/R的引物组合在鉴定茎用芥菜oxa细胞质雄性不育恢复基因中的应用，其中，BjGDI-F的引物序列为：GACAAGGCTCCTGCTCATTTAGG；BjGDI-R的引物序列为：CAATTACTTGGTCACATCGGTATGG；CRY3-F的引物序列为：GGTTCTAGCAGAGACTACAATGTTG；CRY3-R的引物序列为：GTCACATCGGTATGGATAAGGAC。

2.如权利要求1所述的应用，其特征在于：所述的引物组合用于鉴定茎用芥菜oxa 细胞质雄性不育恢复基因的有无以及杂交种纯度，从而用于分子育种的辅助选择。

3.一种茎用芥菜oxa细胞质雄性不育恢复基因的鉴定方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）提取茎用芥菜叶片DNA；

（2）利用权利要求1所述的引物组合对提取的DNA进行PCR扩增；

（3）将扩增产物经1%琼脂糖凝胶电泳分离、GelRed染色后,用凝胶图像分析系统ImageLab分析记录，

若BjGDI-F/R引物组合可以扩增出一条200 bp大小的条带，则确定为不含oxa细胞质雄性不育恢复基因的茎用芥菜；若BjGDI-F/R引物组合可以扩增出一条440 bp大小的条带，则判断为含有oxa细胞质雄性不育恢复基因的茎用芥菜；若CRY3-F/R可以扩增出一条200 bp大小的条带，则判断为不含oxa 细胞质雄性不育恢复基因的纯合芥菜；若CRY3-F/R可以扩增出一条400 bp大小的条带，则判断为含有oxa 细胞质雄性不育恢复基因的纯合芥菜；若CRY3-F/R可以扩增出200 bp和400 bp大小的两条目的条带，则判断为含有oxa细胞质雄性不育恢复基因的杂合芥菜。

4.如权利要求3所述茎用芥菜oxa细胞质雄性不育恢复基因的鉴定方法，其特征在于，所述PCR扩增的程序为：94℃预变性3 min后,94℃反应30 s、58℃反应30 s、72℃反应40 s反应，总共35个循环,最后在72℃延伸10min。

5.一种茎用芥菜oxa细胞质雄性不育恢复基因的检测试剂盒，其特征在于：该试剂盒内包含权利要求1所述的引物组合。