[发明专利]一种猪血木组织培养方法有效
| 申请号： | 202110050053.4 | 申请日： | 2021-01-14 |
| 公开（公告）号： | CN112690215B | 公开（公告）日： | 2022-06-07 |
| 发明（设计）人： | 曾宋君;熊玉萍;文香英;张雪莲;陈双艳;杨科明;吴坤林;房林;李琳;马国华 | 申请（专利权）人： | 中国科学院华南植物园 |
| 主分类号： | A01H4/00 | 分类号： | A01H4/00 |
| 代理公司： | 广州科粤专利商标代理有限公司 44001 | 代理人： | 朱双;刘明星 |
| 地址： | 510650 广*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 猪血 组织培养 方法 | ||
1.一种猪血木组织培养方法，其特征在于，包括以下步骤：
a.取猪血木发育良好的种子，经消毒处理后，接种到种子萌发培养基上培养；所述的种子萌发培养基，每升由以下成分组成：20-30g蔗糖、6g琼脂，余量为1/2MS培养基，pH5.8-6.0；
b.待种子发芽长至苗高1-2厘米时，切取下胚轴接种到不定芽诱导培养基上进行不定芽的诱导；所述的不定芽诱导培养基，每升由以下成分组成：1-5mg KT、20-30mL椰子汁、20-30g蔗糖、6g琼脂，余量为改良的MS培养基，pH 5.8-6.0；所述的改良的MS培养基是将MS培养基中的硝酸钾替换为990mg/L的硫酸钾；
c.将诱导出的不定芽切割成单芽或双芽后继代培养于增殖培养基进行不定芽的增殖培养；所述的增殖培养基，每升由以下成分组成：1-2mg 6-BA、5-15mL椰子汁、20-30g蔗糖、6g琼脂，余量为改良的MS培养基，pH 5.8-6.0；所述的改良的MS培养基是将MS培养基中的硝酸钾替换为990mg/L的硫酸钾；
d.将增殖培养获得的2-3厘米高的丛生芽切成单芽后，接种到壮苗培养基进行壮苗培养；所述的壮苗培养基，每升由以下成分组成：20-30g蔗糖、6g琼脂，余量为改良的MS培养基，pH 5.8-6.0；所述的改良的MS培养基是将MS培养基中的硝酸钾替换为990mg/L的硫酸钾；
e.将壮苗培养获得的高3-4厘米的试管苗，在自然光照温室条件下炼苗7-10天；然后取出试管苗，放入3-5mg/L IBA溶液中浸泡10-30分钟，然后移栽到生根基质中进行生根培养；所述的生根基质是将珍珠岩和蛭石以体积比1-3：1混合得到的；
f.生根培养苗长至6-8厘米高时，进行定植栽培；所述的步骤f的栽培基质为将椰糠、泥炭土、珍珠岩基质以体积比2-4：2-4：1混合得到的。
2.根据权利要求1所述的猪血木组织培养方法，其特征在于，所述的消毒处理具体为：将种子先在体积分数75％乙醇水溶液中浸泡10-30秒，再用质量分数0.1％升汞溶液消毒5-10分钟，无菌水冲洗4-5次。
3.根据权利要求1所述的猪血木组织培养方法，其特征在于，所述的步骤a-c中培养条件为：温度24-28℃，光照度1500-2000lx，光照12-16小时/天。
4.根据权利要求1所述的猪血木组织培养方法，其特征在于，所述的步骤d中培养条件为：温度24-28℃，光照度2000-2500lx，光照12-16小时/天。
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