[发明专利]一种从热带水果中分离得到高效生产茉莉酸的可可毛色二胞菌的生产工艺

权利要求书

1.一种从热带水果中分离得到高效生产茉莉酸的可可毛色二胞菌的生产工艺，其特征在于，包括以下步骤：

S1、将不同品种的热带水果洗净擦干后，室温保存，并观察热带水果的腐烂过程，当热带水果达到6-7成腐烂时，挑出该水果，标记为水果A；

S2、在100mL的无菌生理盐水中，加入同等质量的水果A，在26-30℃条件下旋转震荡30-35min，得到稀菌液a；

S3、取2mL稀菌液a稀释到20mL，混合摇匀，取一定量涂布在PDA板上，在26-30℃条件下培养2-3天，挑选出单一的菌株b；

S4、按上述制备步骤得到菌株b，分离纯化过程中，从菌株b的颜色变化和扫描电镜的表观图来确认是否可可毛色二胞菌，菌株b的培养过程中，颜色从乳白色到浅绿色到深绿色，最后变为黑褐色，并且电镜下观察到的菌体形状为椭圆形；

S5、把纯的菌种b接种于培养基B中，培养2-7天，把培养不同天数的菌种b，按5％、10％和15％的浓度，接种于培养基C中，调节pH值为5.4-5.6，在26-30℃条件下，静置培养,用高效液相色谱分别检测后期的培养液中的茉莉酸含量。

2.根据权利要求1所述的一种从热带水果中分离得到高效生产茉莉酸的可可毛色二胞菌的生产工艺，其特征在于，所述S1中，热带水果采用芒果、龙眼、荔枝、香蕉、菠萝、黄皮中的一种或多种。

3.根据权利要求1所述的一种从热带水果中分离得到高效生产茉莉酸的可可毛色二胞菌的生产工艺，其特征在于，所述S3中，从挑选出的菌株b中观察是否纯化，若观察到菌株b不纯，含有杂菌，重复步骤S3的操作，直至观察到菌株b完全纯化。

4.根据权利要求1所述的一种从热带水果中分离得到高效生产茉莉酸的可可毛色二胞菌的生产工艺，其特征在于，所述S5中，培养基B包括以下质量份的原料：蔗糖35g/L、玉米浆1g/L、硝酸钠3g/L、硫酸锰0.001g/L、硫酸铜0.001g/L、硫酸锌0.01g/L、硫酸镁2g/L、硫酸亚铁0.3g/L、氯化钾0.3g/L和磷酸二氢钾1g/L。

5.根据权利要求1所述的一种从热带水果中分离得到高效生产茉莉酸的可可毛色二胞菌的生产工艺，其特征在于，所述培养基C包括以下质量份的原料：蔗糖50g/L、玉米浆3g/L、硝酸钠7g/L、硫酸锰0.002g/L、硫酸铜0.002g/L、硫酸锌0.02g/L、硫酸镁4g/L、硫酸亚铁0.6g/L、氯化钾0.5g/L和磷酸二氢钾2g/L。