[发明专利]一种用于诱导多能干细胞的无血清培养基及其制备方法在审
申请号: | 202110058538.8 | 申请日: | 2021-01-16 |
公开(公告)号: | CN112852742A | 公开(公告)日: | 2021-05-28 |
发明(设计)人: | 齐国友 | 申请(专利权)人: | 齐国友 |
主分类号: | C12N5/10 | 分类号: | C12N5/10 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 312500 浙江省绍*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 诱导 多能 干细胞 血清 培养基 及其 制备 方法 | ||
1.一种用于诱导多能干细胞的无血清培养基,其特征在于,包括基础培养基,添加在基础培养基中的以下成分:胰岛素、二氯酚嗪、硫酸肝素糖蛋白、呋喃二烯、D-薄荷酮、卡瓦内酯、IFN-γ、EGF、柠檬酸锌。
2.根据权利要求1所述用于诱导多能干细胞的无血清培养基,其特征在于,以终浓度计各组分的用量如下:胰岛素10-15μg/mL、二氯酚嗪1-4μg/mL、硫酸肝素糖蛋白15-20μg/mL、呋喃二烯1-5ng/mL、D-薄荷酮2-7ng/mL、卡瓦内酯10-15μg/mL、IFN-γ5-10ng/mL、EGF10-15ng/mL、柠檬酸锌12-17μg/mL。
3.根据权利要求2所述用于诱导多能干细胞的无血清培养基,其特征在于,以终浓度计各组分的用量如下:胰岛素12μg/mL、二氯酚嗪3μg/mL、硫酸肝素糖蛋白18μg/mL、呋喃二烯3ng/mL、D-薄荷酮5ng/mL、卡瓦内酯12μg/mL、IFN-γ8ng/mL、EGF12ng/mL、柠檬酸锌15μg/mL。
4.根据权利要求1所述用于诱导多能干细胞的无血清培养基,其特征在于,所述基础培养基为DMEM/F12培养基。
5.如权利要求1至4所述用于诱导多能干细胞的无血清培养基的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)向基础培养基中加入胰岛素、二氯酚嗪、硫酸肝素糖蛋白、IFN-γ、EGF搅拌混合均匀;
(2)向步骤(1)的混合物中加入呋喃二烯、D-薄荷酮、卡瓦内酯、柠檬酸锌,继续搅拌至混合均匀后静置,过滤除菌后即得。
6.根据权利要求5所述用于诱导多能干细胞的无血清培养基的制备方法,其特征在,步骤(2)中采用0.22μm的滤菌膜过滤除菌。
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