[发明专利]一种敲除基因proP和proVWX高产苏氨酸的工程菌及其应用

权利要求书

1.一种提高苏氨酸产量的方法，其特征在于，所述方法是敲除大肠杆菌基因组上基因proP和proVWX；敲除所述基因proP的序列如SEQ ID NO.1所示；敲除所述基因proVWX的序列如SEQ ID NO.2所示；所述大肠杆菌为大肠杆菌TWF001。

2.根据权利要求1所述方法，其特征在于，还敲除了细菌磷酸转移酶系统相关基因crr或ptsG；敲除所述基因crr的序列如SEQ ID NO.7所示；敲除所述基因ptsG的序列如SEQ IDNO.6所示。

3.应用权利要求1或2所述方法构建获得的基因工程菌。

4.一种权利要求3所述基因工程菌制备L-苏氨酸的方法，其特征在于，将权利要求3所述基因工程菌置于37℃，200 rpm培养4 h的一级种子液按初始OD₆₀₀为0.1-0.2转接至种子培养基中，37℃，200 rpm培养4 h的二级种子液按初始OD₆₀₀为0.2-0.3转接到发酵培养基中，37℃，200rpm培养36 h。

5.根据权利要求4所述方法，其特征在于，发酵培养基组成为：1-5 g/L酵母粉，1-5 g/L柠檬酸，20-30 g/L(NH₄)₂SO₄，5-10 g/L KH₂PO₄，25-45 g/L葡萄糖，1-5 g/LMgSO₄∙7H₂O，2-8mg/L FeSO₄∙7H₂O，2-8 mg/L MnSO₄∙4H₂O和15-25 g/LCaCO₃，pH=6~7。

6.权利要求1或2所述方法或权利要求3所述基因工程菌在制备L-苏氨酸中的应用。