[发明专利]酶切探针恒温检测呼吸道感染细菌病原体的试剂盒

权利要求书

1.一种酶切探针恒温检测呼吸道感染细菌病原体的试剂盒，其特征在于，将12个病原体靶标各自引物探针组合成四个三重核酸反应液，第一个三重核酸反应液包括用于检测金黄色葡萄球菌、检测大肠杆菌和检测星形奴卡菌的引物和探针；第二个三重核酸反应液包括用于检测铜绿假单胞菌、检测肺炎链球菌和检测嗜麦芽窄食假单胞菌的引物和探针；第三个三重核酸反应液包括用于检测鲍曼不动杆菌、检测流感嗜血杆菌和检测肠球属的引物和探针；第四个三重核酸反应液包括用检测肺炎克雷伯杆菌、检测嗜肺军团菌和检测洋葱伯克霍尔德菌的引物和探针；

检测每一个细菌病原体的探针均是含有一个RNA碱基的探针和包括6条恒温扩增引物，所述探针荧光报告基团标记在RNA碱基的按5’-3’方向的左侧，荧光淬灭基团标记在RNA碱基的按5’-3’方向右侧；每个三重核酸反应液内检测每一个细菌病原体的探针标记不同的荧光基团；

第一个三重核酸反应液包括以下用于检测金黄色葡萄球菌、检测大肠杆菌和检测星形奴卡菌的引物和探针，检测金黄色葡萄球菌的引物是SEQ ID No：1-6，探针是SEQ ID No：7所示；检测大肠杆菌的引物是SEQ ID No：8-13，探针是SEQ ID No：14；和检测星形奴卡菌的引物是SEQ ID No：15-20，探针是SEQ ID No：21，

，其中“SA”代表金黄色葡萄球菌，“Ecoli”代表大肠杆菌，和“NuA”代表星形奴卡菌；

第二个三重核酸反应液包括以下用于检测铜绿假单胞菌、检测肺炎链球菌和检测嗜麦芽窄食假单胞菌的引物和探针，检测铜绿假单胞菌的引物是SEQ ID No：22-27，探针是SEQID No：28所示；检测肺炎链球菌的引物是SEQ ID No：29-34，探针是SEQ ID No：35；和检测嗜麦芽窄食假单胞菌的引物是SEQ ID No：36-41，探针是SEQ ID No：42，

，其中“PA”代表铜绿假单胞菌，“SP”代表肺炎链球菌，和“Sme”代表嗜麦芽窄食假单胞菌；

第三个三重核酸反应液包括以下用于检测鲍曼不动杆菌、检测流感嗜血杆菌和检测肠球属的引物和探针，检测鲍曼不动杆菌的引物是SEQ ID No：43-48，探针是SEQ ID No：49所示；检测流感嗜血杆菌的引物是SEQ ID No：50-55，探针是SEQ ID No：56；和检测肠球属的引物是SEQ ID No：57-62，探针是SEQ ID No：63，

，其中“Aba”代表鲍曼不动杆菌，“HI”代表流感嗜血杆菌，和“Ec”代表肠球属；

第四个三重核酸反应液包括以下用于检测肺炎克雷伯杆菌、检测嗜肺军团菌和检测洋葱伯克霍尔德菌的引物和探针，检测肺炎克雷伯杆菌的引物是SEQ ID No：64-69，探针是SEQ ID No：70所示；检测嗜肺军团菌的引物是SEQ ID No：71-76，探针是SEQ ID No：77；和检测洋葱伯克霍尔德菌的引物是SEQ ID No：78-83，探针是SEQ ID No：84，

，其中“Kpn”代表肺炎克雷伯杆菌，“LP”代表嗜肺军团菌，和“BC”代表洋葱伯克霍尔德菌。

2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，荧光报告基团可分别为FAM、VIC、HEX、ROX、Texas Red、CY3、CY5中的任一种，所述淬灭基团是BHQ1、BHQ2、BHQ3中任一种。