[发明专利]免脱色聚丙烯酰胺凝胶蛋白快速染色液及制备和使用方法在审
申请号: | 202110080583.3 | 申请日: | 2021-01-21 |
公开(公告)号: | CN112697562A | 公开(公告)日: | 2021-04-23 |
发明(设计)人: | 吴军;黄人卉;赵剑 | 申请(专利权)人: | 上海雅酶生物医药科技有限公司 |
主分类号: | G01N1/30 | 分类号: | G01N1/30;G01N33/68 |
代理公司: | 上海创开专利代理事务所(普通合伙) 31374 | 代理人: | 吴海燕 |
地址: | 201100 上海市*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 脱色 聚丙烯酰胺 凝胶 蛋白 快速 染色 制备 使用方法 | ||
1.免脱色聚丙烯酰胺凝胶蛋白快速染色液,其特征在于,包括如下配方:0.025%(W/V)的考马斯亮蓝G-250、10-20%(V/V)的乙醇、1-10%(W/V)的硫酸铵、0.5-5%(W/V)的环糊精、盐酸调pH值至1.2-1.4。
2.根据权利要求1所述的免脱色聚丙烯酰胺凝胶蛋白快速染色液,其特征在于,所述环糊精采用α-环糊精、β-环糊精、γ-环糊精或其它改性环糊精中任意一种。
3.如权利要求1-2任一项所述的免脱色聚丙烯酰胺凝胶蛋白快速染色液的制备方法,其特征在于,以定容1L为基准,包括如下步骤:
S1、称取10-100g的所述浓度的硫酸铵,溶解于600ml去离子水中,搅拌溶解;
S2、加入5-50g的所述浓度的环糊精,搅拌溶解;
S3、称取0.1-0.25g的所述浓度的考马斯亮蓝G-250,溶于20ml去离子水中,搅拌溶解;将所得溶液加入至S2步骤混合液中;
S4、加入100-200ml的所述浓度乙醇至混合液,并搅拌混匀;
S5、向混合液中加入盐酸,调节pH值至1.2-1.4;
S6、用去离子水定容至1L,室温避光,保存至少一年。
4.根据权利要求3所述的免脱色聚丙烯酰胺凝胶蛋白快速染色液的制备方法,其特征在于,以定容1L为基准,包括如下步骤:
S1、称取40g的所述浓度的硫酸铵,溶解于600ml去离子水中,搅拌溶解;
S2、加入15g的所述浓度的α-环糊精,搅拌溶解;
S3、称取0.15g的所述浓度的考马斯亮蓝G-250,溶于20ml去离子水中,搅拌溶解;将所得溶液加入至S2步骤混合液中;
S4、加入150ml的所述浓度乙醇至混合液,并搅拌混匀;
S5、向混合液中加入盐酸,调节pH值至1.3;
S6、用去离子水定容至1L,室温避光,保存至少一年。
5.如权利要求1-2任一项所述的免脱色聚丙烯酰胺凝胶蛋白快速染色液的使用方法,其特征在于,包括如下步骤:电泳结束后,将凝胶剥离玻璃板,放入染色盒中,将所述染色液颠倒混匀后,倒入适量染色液,摇床上摇2-10min,根据所需得到蛋白条带的清晰程度需要,适当增加染色时间。
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