[发明专利]偶联新型冠状病毒S2蛋白的磁珠及其制备方法与应用

权利要求书

1.偶联新型冠状病毒S2蛋白的磁珠，其特征在于，所述偶联新型冠状病毒S2蛋白的磁珠是将表面修饰有链霉亲和素的磁珠与生物素标记的新型冠状病毒S2蛋白结合制得的；

其中，新型冠状病毒S2蛋白包含如下的氨基酸序列或由其组成：

i）如SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列；或

ii）在i）的N端和/或C端连接标签得到的氨基酸序列；或

iii）i）或ii）的氨基酸序列经取代、缺失和/或增加一个或多个氨基酸得到的具有相同功能的蛋白；

磁珠的粒径大小为1-5μm，链霉亲和素共价偶联于磁珠表面，每mg磁珠偶联500-2000pmol链霉亲和素；所述表面修饰有链霉亲和素的磁珠可结合游离生物素的量为500-2000pmol/mg磁珠；

所述生物素标记的新型冠状病毒S2蛋白中，生物素与新型冠状病毒S2蛋白的摩尔比为0.5-1:1；

所述偶联新型冠状病毒S2蛋白的磁珠中新型冠状病毒S2蛋白的含量为30-60μg/mg磁珠；

所述磁珠的制备方法包括以下步骤：

（1）将表面修饰有链霉亲和素的磁珠，用缓冲液洗涤3-5次；

（2）加入生物素标记的新型冠状病毒S2蛋白，室温混合孵育；

（3）孵育结束后，用磁性分离器分离反应后的磁珠，弃上清，用缓冲液洗涤3-5次；

（4）对磁珠进行冷冻干燥：用含0.01-0.1%吐温20和5-20%海藻糖的0.01M PBS液配制浓度为10mg/mL的磁珠悬液，然后于-80℃冷冻干燥20-40小时。

2.根据权利要求1所述的磁珠，其特征在于，步骤（1）包括：取1mg表面修饰有链霉亲和素的磁珠，加入1mL洗涤液混匀，将体系置于磁性分离器上2-3分钟，弃上清，重复洗涤2次；

其中，所述洗涤液为PBST液，其成分为含0.01-0.1%吐温20的0.01M PBS液；

步骤（2）包括：向洗涤后的磁珠中加入1mL用PBST液稀释到60μg/mL的生物素标记的新型冠状病毒S2蛋白，涡旋混匀，于室温孵育0.5-2小时；

步骤（3）包括：孵育结束后，将磁珠置于磁性分离器上2-5分钟，收集上清用于测定新型冠状病毒S2蛋白的偶联量；磁珠用缓冲液洗涤3-5次。

3.权利要求1或2所述磁珠在抗新型冠状病毒S2蛋白抗体筛选中的应用；所述应用为非诊断和治疗目的。

4.权利要求1或2所述磁珠在表达抗新型冠状病毒S2蛋白抗体的酵母展示文库筛选中的应用。