[发明专利]一种定量检测TEX101浓度的荧光试剂条的制备方法及其应用

说明书

本发明公开了一种定量检测TEX101浓度的荧光试剂条的制备方法及其应用，属于体外诊断试剂领域，本发明将荧光免疫层析技术引入TEX101的检测中，制备所得的TEX101的免疫层析试纸条的采用双抗体夹心法，样本垫中的TEX101抗原在层析作用下与标记垫上荧光微球标记的TEX101抗体结合形成复合物，该复合物在层析作用下移动至包被膜的检测线，由于包被膜检测线上包被有识别TEX101抗原的另一表位的抗体，形成双抗体夹心复合物；可检测精液样本中TEX101的浓度，通过免疫荧光分析仪即可得读取检测结果，无需专业操作人员，实现了TEX101的单人份定量检测，具有方便快捷、操作简单、灵敏度高、操作简单、检测成本低等优点。

技术领域

本发明涉及体外诊断试剂领域，具体涉及一种定量检测TEX101浓度的荧光试剂条的制备方法及其应用。

背景技术

无精子症是指在射精过程中完全没有精子，它占男性不育病例的10〜15%，占所有无精子症病例的60%，无精子症分为阻塞性无精子症OA和非阻塞性无精子症NOA，阻塞性无精子症OA和非阻塞性无精子症NOA的治疗对应不同的治疗方法。

目前临床上精子质量的评估主要采用：精液分析和性激素血清学检测。精液分析是最常用的检测方法，但是其分析结果受主观因素影响、精密度低、重复性差，对男性生育力评估和临床应用的价值有限；而性激素血清学检测如FSH、睾酮、抑制素B等则无法预测男性辅助生殖PESA/TESE的结果；并且以上两类检测方法都无法区分梗阻性无精症OA和非梗阻性无精症NOA，无法对症治疗，因此，临床上迫切需要新型的生物标记物，用于客观评估男性生育力，鉴别梗阻性无精症OA和非梗阻性无精症NOA，预测辅助生殖的结局。

发明内容

本发明的目的在于针对现有技术中存在的不足和局限，提供一种操作简单、方便快捷、经济、测定准确的TEX101检测试纸条制备方法及其应用。

本发明的技术方案是：一种定量检测TEX101浓度的荧光试剂条的制备方法，该试剂条包括顺次衔接于PVC底板的样品垫、标记垫、包被膜、吸水纸；

标记垫上喷涂有荧光微球标记的第一TEX101单克隆抗体和荧光微球标记的亲和素；

包被膜包含检测线和质控线：检测线与质控线之间的间隔为4〜8nm，所述检测线包被有与所述荧光微球标记的第一TEX101单克隆抗体处于不同表位的第二TEX101单克隆抗体，质控线包被有特异性识别亲和素的兔抗亲和素抗体。

进一步的技术方案，荧光微球标记的第一TEX101单克隆抗体的浓度为0.1〜1.0mg/mL，稀释比例为5%〜20%；所述荧光微球标记的亲和素的浓度为0.1〜1.0mg/mL，稀释比例为0.5%〜5%。

进一步的技术方案，含荧光微球标记的第一TEX101单克隆抗体和荧光微球标记的亲和素的标记垫处理液的喷量为3〜6 μL/cm。

进一步的技术方案，荧光微球的粒径为100〜500nm；所述荧光微球的激发波长为310〜550nm，发射波长为340〜620nm。

进一步的技术方案，检测线上包被的第二TEX101单克隆抗体的浓度为0.5〜2 mg/mL，喷量 0.1〜0.2μL/cm；所述质控线上包被的兔抗亲和素抗体的浓度为0.5〜2 mg/mL，喷量为0.1〜1.0L/mm。

一种用于制备定量检测TEX101浓度的荧光试剂条的制备方法，包括以下步骤：