[发明专利]一种盐桦组织培养高效繁殖方法

权利要求书

1.一种盐桦组织培养高效繁殖方法，其特征在于，包括以下步骤：

a.外植体的消毒和不定芽诱导：在生长季节选取盐桦(Betula halophile)成年树的当年生的幼嫩茎节为外植体，经消毒处理后，接种到不定芽诱导培养基上进行不定芽的诱导，培养温度24-28℃，光照度1500-2000lx，光照12-16小时/天，培养形成不定芽；所述的不定芽诱导培养基每升含有：6-苄基嘌呤0.5-1.0毫克、萘乙酸0.1-0.3毫克、蔗糖20-30克、琼脂适量，其余为B5基本培养基，pH 5.8-6.0；

b.不定芽继代增殖：将诱导出的不定芽切割成单芽后接种到不定芽继代增殖培养基上进行不定芽的增殖，培养温度24-28℃，光照度1500-2000lx，光照12-16小时/天；所述的不定芽继代增殖培养基每升含有：6-苄基嘌呤0.5-1.0毫克、蔗糖20-30克、琼脂适量，其余为MS培养基，pH 5.8-6.0；

c.壮苗培养：将高2～3厘米芽接种到壮苗培养基上培养，培养温度24-28℃，光照度1800-2500lx，光照12-16小时/天；所述的壮苗培养基每升含有：IBA 0.5-1.5毫克、多效唑0.5-1.0毫克、蔗糖30-45克、琼脂适量，其余为MS培养基，pH 5.8-6.0；

d.生根培养：当芽高3～4厘米高时，切下接种到生根培养基上培养，培养温度24-28℃，光照度1800-2500lx，光照12-16小时/天，得到生根试管苗；所述的生根培养基每升含有：萘乙酸0.3-0.5毫克、蔗糖20-30克、琼脂适量，其余为1/2MS培养基，pH 5.8-6.0；

e.试管苗移栽：当生根试管苗长至4～6厘米高时，在自然光照下炼苗7-10天，然后洗掉根部培养基，栽入栽培基质中培养，由此得到盐桦种苗。

2.根据权利要求1所述的盐桦组织培养高效繁殖方法，其特征在于，所述的步骤b.不定芽继代增殖具体为：将诱导出的不定芽切割成单芽后接种到不定芽继代增殖培养基上进行不定芽的增殖，培养温度24-28℃，光照度1500-2000lx，光照12-16小时/天，连续培养2次后，将每个芽切成带有两个茎节的茎段接种到不定芽继代增殖培养基上进行增殖，培养温度24-28℃，光照度1500-2000lx，光照12-16小时/天。

3.根据权利要求1所述的盐桦组织培养高效繁殖方法，其特征在于，所述的消毒处理具体为先在体积分数75％酒精中浸泡10-30秒，再用质量分数0.1％升汞溶液连续消毒若干次，每次消毒后用无菌水冲洗4-6次。

4.根据权利要求3所述的盐桦组织培养高效繁殖方法，其特征在于，所述的用质量分数0.1％升汞溶液连续消毒若干次具体为：用质量分数0.1％升汞溶液连续消毒3次，第一次消毒时间为4-6分钟，第二次消毒时间为3-5分钟，第三次消毒时间为1-3分钟。

5.根据权利要求1所述的盐桦组织培养高效繁殖方法，其特征在于，所述的栽培基质包括泥炭土、珍珠岩和蛭石，所述的泥炭土、珍珠岩和蛭石的体积比为(2-4):(1-3):1。