[发明专利]一种快速分析动物源性食品中利尿剂残留量的方法

说明书

本发明提供了一种快速分析动物源性食品中利尿剂残留量的方法。本方法采用乙腈提取目标化合物，经氮吹浓缩后采用Cyclone‑p在线固相萃取柱净化，流动相采用乙腈‑水进行梯度洗脱，在正负离子全扫描/数据依赖二级扫描(FullScan/ddMS2)模式下进行质谱分析，一级扫描准分子离子峰定量。结果表明，10种利尿剂在各自线性范围内呈良好线性关系，相关系数大于0.99，检出限为0.3‑1μg/kg，定量限为1‑3μg/kg。待测物在平均回收率在70.8％～117.5％之间，相对标准偏差在4.0％～14.5％之间。该方法前处理简单，快速，灵敏度高，可用于动物源性食品中利尿剂的快速定性定量分析。

技术领域

本发明涉及利尿剂残留量的检测方法技术领域，尤其涉及一种快速分析动物源性食品中利尿剂残留量的方法。

背景技术

利尿剂在畜禽养殖常被用作治疗奶牛乳房炎、改善禽蛋蛋白比例，以及治疗心、肝、肾等各类水肿。在GB31650-2019中明确规定允许将氢氯噻嗪用于牛的养殖过程，且不需要制定残留限量。利尿剂的广泛应用，再加之有一些不法商贩利用该类药物可以迅速排尿的功能来掩盖其使用的其他违禁药物，这就导致动物体内存在残留利尿剂的风险。但是利尿利是被世界反兴奋剂机构(WADA)列为禁用药物清单里的一类兴奋剂。如果运动员误食了残留利尿剂的动物源性食品会造成兴奋剂尿检阳性，严重影响运动员的职业生涯。因此，为保证体育赛事的食品安全性，2019年8月，体育总局反兴奋剂中心在《大型赛事食源性兴奋剂防控工作指南(暂行)》的通知中，将乙酰唑胺等10种利尿剂列为肉食品兴奋剂建议检测项目。然而，目前关于利尿剂的检测多为血液、尿液、饲料、中草药制剂和保健食品样本，对于动物源性食品中利尿剂的检测报道较少，仅见“超高效液相色谱-串联质谱法测定鸡肉和猪肉中利尿剂残留量”薛颖等采用液相色谱串联质谱法测定了鸡肉和猪肉中呋塞米、螺内酯和布美他尼3种化合物，该研究测定的基质范围和化合物种类都非常有限，难以满足当前监管需求。因此，建立动物源性食品中利尿剂残留的检测技术对于营造健康安全消费环境，保障体育运动的食品安全具有重要意义。

目前关利尿剂检测有液相色谱法、气相色谱-质谱法和液相色谱-串联质谱法。以上测定方法中液相色谱法灵敏度低、定性能力差；气相色谱-质谱法需要衍生化处理才能检测，检测项目有限；液相色谱-串联质谱法虽然灵敏度高、抗干扰能力强，但与高分辨质谱相比在选择性和阳性确证方面仍存在不足。在前处理方面，利尿剂多采取不净化、QuEChERS或者固相萃取的净化方式。对于含有较多的蛋白、磷脂的动物源性食品仍需要较好的净化方式以降低对目标物的基质干扰。

因此，如何提供一种快速分析动物源性食品中利尿剂残留量的方法，使对多种利尿剂残留量检测方法简单、灵敏度高、实现对动物源性食品中利尿剂进行快速的定性定量分析，是本领域亟待解决的难题。

发明内容

有鉴于此，本发明公开了一种快速分析动物源性食品中利尿剂残留量的方法，本发明解决了现有技术中对动物源性食品残留利尿剂检测方法报道较少，没有公开同时对多种利尿剂进行检测的问题。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

取待检测样品，采用TurboFlow在线固相萃取-液相色谱-高分辨质谱法对其进行检测；

所述在线固相萃取条件如下：净化柱为Cyclone-P聚合物柱(0.5×50mm，60μmparticle size，pore size)

流动相：A相为乙酸铵+乙酸溶液、B相为乙腈、C相为丙酮+乙腈+异丙醇；

0-1min 100％A，0％B，0％C；

1-3min 60％A，40％B，0％C；

3-9min 0％A，0％B，100％C；

9-18.5min 0％A，100％B，0％C；