[发明专利]抗TIGIT抗体及其应用

说明书

本申请提供了抗TIGIT(VSIG9、VSTM3、WUCAM)抗体及其用途。本申请还提供了抗TIGIT抗体的嵌合抗体和人源化抗体形式。本申请的抗TIGIT抗体能够与哺乳动物PVR特异性结合，优选地具有对人和/或灵长类动物TIGIT蛋白的高亲和性、在一定浓度下可阻断TIGIT与其配体的结合、调节受体活性、刺激T细胞的活化、抑制Treg功能，从而更好的发挥效应T细胞作用等效果。本申请的抗TIGIT抗体可用于治疗TIGIT相关疾病。

技术领域

本申请涉及免疫学领域，更具体地，本申请涉及抗TIGIT的抗体及其应用。

背景技术

免疫系统识别并清除癌症细胞的概念最早是在100多年前提出的，在不同类型癌症病人血液中可以检测到T细胞对癌症相关抗原的反应性。在有效的抗肿瘤免疫过程中，T细胞作为核心的执行者，首先被T细胞受体(T cell receptor，TCR)介导的抗原识别信号活化，同时众多的共刺激信号和共抑制信号精细调节T细胞反应的强度和质量，这些抑制信号即为免疫检查点。

免疫系统进化出了多种机制用来阻止免疫细胞的有害激活。其中一种机制就是T细胞共刺激和共抑制信号之间的平衡。B7-1(CD80)/B7-2(CD86)-CTLA-4通路是T细胞活化最具特征性的抑制通路。另一条抑制通路涉及程序性死亡-1(PD-1)，通过与PD-L1(B7-H1)和PD-L2(B7-DC)相互作用负向调节T细胞活化。T细胞活化的第三个共抑制分子B细胞和T细胞弱化子(BTLA)是与CTLA-4和PD-1相似的细胞表面分子。由于这些抑制性复合受体抑制T细胞增殖和细胞因子产生，因此被认为在维持免疫稳态和耐受过程中发挥重要作用。大量证据表明共刺激分子在预防自身免疫性疾病过程中起关键作用，因为这些分子缺失或者功能突变加速基因自身免疫性和多态性与人自身免疫性疾病遗传易感性相关联。

在生理情况下，共刺激分子与免疫检查点分子保持平衡，从而最大程度减少对于周围正常组织的损伤，维持对自身组织的耐受、避免自身免疫反应。而肿瘤细胞可以通过此机制，异常上调共抑制分子及其相关配体，抑制T细胞活化，从而逃避免疫杀伤。针对免疫检查点的阻断是增强T细胞活化的有效策略之一，也是近些年抗肿瘤药物开发的热门靶点。到目前为止，已有3个免疫检查点抑制剂在美国获批，用于治疗多种癌症类型，靶点分别是CTLA-4和PD-1/PD-L1。

2008年，Xin Yu等(2009)运用基因芯片扫描的检索策略，对活化的人类T细胞进行了测序，并对一些具有免疫调节样结构域的蛋白质分子进行了进一步的研究，发现了一个在T细胞和NK上表达的新分子，该分子具有免疫球蛋白样结构域、跨膜区和免疫受体蛋白酪氨酸抑制基序(ITIM)，因此命名为TIGIT(T cell immunoglobulin and ITIM domain)。

阻断型免疫检查点分子，主要指T细胞活化的共抑制信号分子-T细胞共抑制受体，研究表明TIGIT、CTLA-4和PD-1在T细胞活化过程中发挥免疫抑制作用，从而抑制T细胞对肿瘤细胞的免疫杀伤功能；而针对这三个靶点的阻断性单克隆抗体可以解除这种免疫抑制，恢复T细胞抗肿瘤免疫功能。

TIGIT基因位于人类第16号染色体，编码由244个氨基酸组成的I型跨膜蛋白。人TIGIT分子具有长141个氨基酸的胞膜外区，该区域具有1个免疫球蛋白V样结构域；长23个氨基酸的跨膜区；和长80个氨基酸的较短的胞质区，该区域具有1个PDZ结合结构域和1个ITIM模体。人TIGIT分子的结构如图13所示。TIGIT(又称VSIG9、VSTM3、WUCAM)是免疫受球蛋白脊髓灰质炎病毒受体家族CD28家族样受体的一员，在T细胞和自然杀伤(NK)细胞亚群中表达，但一般情况下，其表达水平很低，而当这些细胞活化后，其蛋白水平会上调。比如在肿瘤微环境中，肿瘤浸润淋巴细胞中的TIGIT经常处于高表达水平，TIGIT可与免疫细胞、非免疫细胞以及肿瘤细胞中的受体CD155(poliovirus receptor-PVR)、CD112(PVRL2，nectin-2)、CD113(PVRL3，Nectin-3)结合，结合后导致T细胞活化，T细胞和自然杀伤细胞的细胞毒性受到抑制。