[发明专利]一种体外诱导人间充质干细胞分化成骨的方法

权利要求书

1.一种体外诱导人间充质干细胞分化成骨的方法，其特征在于，具体步骤包括：

S1.制备MM3培养基；

S2.增扩培养；

S3.诱导分化培养；

S4.染色鉴定。

2.根据权利要求1所述的一种体外诱导人间充质干细胞分化成骨的方法，其特征在于，所述MM3培养基的原料包括营养成分和间充质干细胞无血清基础培养基。

3.根据权利要求2所述的一种体外诱导人间充质干细胞分化成骨的方法，其特征在于，所述营养成分包括胎牛血清和/或血清替代物。

4.根据权利要求2所述的一种体外诱导人间充质干细胞分化成骨的方法，其特征在于，所述营养成分和间充质干细胞无血清基础培养基的体积比为1：(15-25)。

5.根据权利要求1所述的一种体外诱导人间充质干细胞分化成骨的方法，其特征在于，所述增扩培养的操作条件为：使用孔板以3-8×10⁴/孔的密度接入人间充质干细胞。

6.根据权利要求1所述的一种体外诱导人间充质干细胞分化成骨的方法，其特征在于，所述诱导分化培养需要定期更换培养基，更换培养基的周期为1-4天。

7.根据权利要求1所述的一种体外诱导人间充质干细胞分化成骨的方法，其特征在于，所述S2步骤和S3步骤的培养条件均为：置于36-38℃，3-6.4％CO₂培养箱中培养。

8.根据权利要求1所述的一种体外诱导人间充质干细胞分化成骨的方法，其特征在于，所述S2步骤中增扩培养的时间为20-56h。

9.根据权利要求1所述的一种体外诱导人间充质干细胞分化成骨的方法，其特征在于，所述S3步骤中诱导分化培养的时间为20-30天。

10.一种根据权利要求1-9任一项所述的体外诱导人间充质干细胞分化成骨的方法的应用，其特征在于，该方法应用于骨髓间充质干细胞、脐带间充质干细胞、脂肪间充质干细胞、胎盘间充质干细胞、羊膜间充质干细胞的诱导分化成骨。