[发明专利]一种用于同时检测多种鸡传染性支气管炎病毒的引物对、试剂盒及其检测方法在审
| 申请号： | 202110106271.5 | 申请日： | 2021-01-26 |
| 公开（公告）号： | CN112795697A | 公开（公告）日： | 2021-05-14 |
| 发明（设计）人： | 樊顺怡;李念灵;李淑芸;申玉玺;李永新;夏静;黄勇 | 申请（专利权）人： | 四川农业大学 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/686;C12N15/11 |
| 代理公司： | 成都正华专利代理事务所(普通合伙) 51229 | 代理人： | 郭艳艳 |
| 地址： | 611130 四*** | 国省代码： | 四川;51 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 用于 同时 检测 多种 传染性 支气管炎 病毒 引物 试剂盒 及其 方法 | ||
1.一种用于同时检测多种鸡传染性支气管炎病毒的引物对，其特征在于，所述引物对的核苷酸序列如SEQ ID NO.1和2所示。
2.根据权利要求1所述的引物对，其特征在于，所述引物对用于扩增鸡传染性支气管炎病毒的保守区域1ab。
3.根据权利要求1所述的引物对，其特征在于，所述鸡传染性支气管炎病毒包括Mass、QX、793B、TW、ck/CH/LSC/99I、TC07-2基因型中的至少一种。
4.一种同时检测多种鸡传染性支气管炎病毒的方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)提取样品RNA，反转录得到cDNA备用；
(2)以步骤(1)所得cDNA为模板，采用权利要求1所述引物对其进行PCR扩增，回收纯化扩增产物后，根据扩增结果判断是否含有鸡传染性支气管炎病毒。
5.根据权利要求4所述的同时检测多种鸡传染性支气管炎病毒的方法，其特征在于，所述PCR扩增体系为：TB Green 10μL、DNA模板1μL、SEQ ID NO.1和2所示引物各0.8μL，最后用ddH2O补足至20μL。
6.根据权利要求4所述的同时检测多种鸡传染性支气管炎病毒的方法，其特征在于，所述PCR扩增条件为：95℃预变性30s；95℃变性10s；58℃退火20s；72℃延伸25s，共40个循环。
7.一种用于同时检测多种鸡传染性支气管炎病毒的试剂盒，其特征在于，包括权利要求1所述的引物对。
8.一种测定鸡传染性支气管炎病毒载量的方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)构建标准质粒，并采用权利要求1所述引物对进行PCR扩增，得到标准曲线；
(2)提取样品RNA，反转录得到cDNA备用；
(3)引物对与样品分别进行普通PCR扩增，检测通用性；
(4)以步骤(2)所得cDNA为模板，按照权利要求4所述过程进行PCR扩增，然后按照公式：样品核酸拷贝数＝样品核酸拷贝数×10×6计算其核酸拷贝数即可。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于四川农业大学，未经四川农业大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/202110106271.5/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
- 上一篇：一种钻孔测深装置及方法
- 下一篇：人群行为检测方法及装置、电子设备和存储介质
