[发明专利]一种生物因子涂层支架及其制备方法

权利要求书

1.一种生物因子涂层支架的制备方法，其特征在于，所述生物因子涂层支架的制备方法包括：

利用多巴胺DA自聚合形成聚多巴胺PDA，在金属表面与金属形成不可逆的有机络合物，使PDA作为连接支架与生物因子媒介涂层；

在支架表面构建成聚多巴胺PDA涂层后，利用席夫碱反应和迈克尔加成依次加载肝素Hep、血管内皮生长因子VEGF和抗CD34抗体，获得生物因子涂层支架。

2.如权利要求1所述的生物因子涂层支架的制备方法，其特征在于，所述生物因子涂层支架的制备方法还包括：使用酶标仪进行OD值测量细胞增殖速率，并使用SPSS22.0统计数据。

3.如权利要求1所述的生物因子涂层支架的制备方法，其特征在于，所述生物因子涂层支架的制备方法还包括：通过扫描电镜以及CCK-8细胞计数曲线，确定所述生物因子涂层支架在静态环境和动态环境下内皮祖细胞的捕获能力。

4.如权利要求1所述的生物因子涂层支架的制备方法，其特征在于，所述生物因子涂层支架的制备方法具体包括：

步骤一，将多巴胺溶解于Tris-Hcl缓冲溶液10.0mM，pH＝8.5中，制成2mg/mL的多巴胺溶液；将Ni-Ti材质的支架浸入多巴胺溶液中。摇匀24小时后，用去离子水冲洗支架，再干燥24小时，得到涂有PDA的支架；

步骤二，在支架表面构建成聚多巴胺PDA涂层后，将肝素钠溶液5mg/mL,pH＝7.2滴入DA支架中，持续1h；将支架样品冲洗干燥；

步骤三，对于构建VEGF涂层，在4℃下，将DA-Hep支架样品用1.0μg/mL VEGF溶液浸泡48小时，然后用磷酸盐缓冲盐水缓冲液PBS冲洗，得到DA-VEGF-Hep样品，晾干备用。

5.如权利要求4所述的生物因子涂层支架的制备方法，其特征在于，所述生物因子涂层支架的制备方法构建抗CD34抗体涂层，DA-Hep支架样品用2.0μg/mL抗CD34抗体溶液在4℃条件下浸泡48小时，用PBS缓冲液冲洗后晾干，得到DA-CD34-Hep。

6.如权利要求1所述的生物因子涂层支架的制备方法，其特征在于，所述生物因子涂层支架的制备方法的生物因子涂层支架的表征及分析方法还包括：激光共聚焦LSCM分析支架表面涂层的负载情况；接触角分析；血小板激活分析以及凝血时间分析；蛋白质吸附释放实验分析；使用酶标仪进行OD值测量细胞增殖速率，并使用SPSS22.0统计数据。

7.一种由权利要求1～6任意一项所述生物因子涂层支架的制备方法制备的生物因子涂层支架，具有PDA涂层的Ni-Ti支架；具有肝素钠涂层的DA支架；具有VEGF涂层的DA-Hep支架；具有抗CD34抗体涂层的DA-Hep支架；不含肝素的支架；同时装载PDA、生物因子和肝素的支架。