[发明专利]一种耐碳青霉烯类抗生素肠杆菌科细菌的筛查显色平板

说明书

本发明属于细菌检测技术领域，具体涉及一种耐碳青霉烯类抗生素肠杆菌科细菌的筛查显色平板。所述显色平板包含特异性显色底物和选择性培养基；其中，所述选择性培养基，包括以下组分：酵母提取物、水杨苷、阿拉伯胶、柠檬酸钠、叶酸、维生素B1、维生素E。该显色平板可用于临床耐碳青霉烯类抗生素耐药菌株的快速筛查，且准确率较高。

技术领域

本发明属于细菌检测技术领域，具体涉及一种耐碳青霉烯类抗生素肠杆菌科细菌的筛查显色平板。

背景技术

肠杆菌科细菌属于革兰阴性杆菌，包括大肠杆菌，肺炎克雷伯菌，阴沟肠杆菌等，常存在于人体的上呼吸道和肠道，当机体抵抗力降低时，可引起全身各器官、组织的感染。

亚胺培南和美罗培南等是临床常用的碳青霉烯类抗生素，因其具有抗菌谱广泛、抗菌活性强、对β-内酰胺酶稳定，以及毒性低等特点，已经成为临床上治疗严重细菌感染最主要的抗菌药物之一，曾被认为是对抗ESBLs酶、AmpC酶稳定的β-内酰胺类抗菌药物，但是，随着临床上使用碳青霉烯类抗生素的增加，碳青霉烯类抗生素耐药的细菌也不断增加。碳青霉烯酶的出现及迅速传播，导致细菌对碳青霉烯类抗生素耐药，几乎突破了临床抗感染治疗的最后一道防线。尤其是人们生活中普遍存在的大肠菌群被发现可携带耐药基因blaNDM-1，有报道指出blaNDM-1基因常与其他β-内酰胺酶基因共存于细菌可转移的基因元件上，使多重耐药性广泛传播，导致携带该类基因的细菌成为全球公共卫生威胁。

用于检测大肠菌群的方法有很多，主要依靠常规的细菌学培养方法、免疫学方法、核酸探针技术等。细菌学培养方法需经富集培养、选择性分离、形态特征观察、生理生化反应、血清学鉴定等过程，一般需4到7天，操作繁琐、费时耗力并且敏感性低、特异性差，且无法检测受损菌及死菌；免疫学方法易污染，且交叉反应比较严重、假阳性多、灵敏度偏低；核酸探针检测技术的最大优点是特异性强，但探针检测技术中也存在一定的问题，如灵敏度不够高；检测一种菌就需制备一种探针。纸片法也是大肠菌群快速检测常用的方法；但是容易受到待检产品本身性质的影响，造成准确率降低。

因此，开发一种快速、准确的耐碳青霉烯类抗生素的肠杆菌科细菌(Carbapenem-resistant Enterobacteriaceae,CRE)的显色平板，用于临床耐碳青霉烯类抗生素耐药菌株的快速筛查，具有重要的作用。

发明内容

为克服以上技术问题，本发明提供了一种耐碳青霉烯类抗生素肠杆菌科细菌(CRE)的筛查显色平板，可用于临床耐碳青霉烯类抗生素耐药菌株的快速筛查。

为实现以上目的，本发明提供的技术方案如下：

一种耐碳青霉烯类抗生素肠杆菌科细菌的筛查显色平板，包含特异性显色底物和选择性培养基；其中，所述选择性培养基，包括以下组分：酵母提取物、水杨苷、阿拉伯胶、柠檬酸钠、叶酸、维生素B1、维生素E。

优选地，按照重量份数计，所述选择性培养基，包括以下组分：酵母提取物5-10份、水杨苷0.1-2份、阿拉伯胶0.5-2份、柠檬酸钠1-5份、叶酸0.01-0.05份、维生素B1 0.01-0.05份、维生素E 0.01-0.05份。

优选地，所述酵母提取物的制备方法，包括以下步骤：

(1)取酵母乳液，恒温自溶，酶解；制得酶解液；

(2)取酶解液的上清液，减压浓缩，制得酵母提取液。

优选地，所述酵母乳液的有效含量为5-10％；

优选地，所述恒温自溶的温度为40-60℃；优选为45℃；

优选地，所述酶解用酶为β-木糖苷酶、木瓜酶和葡聚糖酶；

优选地，所述β-木糖苷酶、木瓜酶和葡聚糖酶的质量比为1：2-3：1-2；