[发明专利]一种解脲脲原体蛋白UUR10_0288蛋白及其检测方法与应用在审
申请号: | 202110122013.6 | 申请日: | 2021-01-29 |
公开(公告)号: | CN112945885A | 公开(公告)日: | 2021-06-11 |
发明(设计)人: | 张军华;陈列松;苏艳荣;黄蓉;张晶晶 | 申请(专利权)人: | 中南大学湘雅三医院 |
主分类号: | G01N21/33 | 分类号: | G01N21/33;G01N21/78 |
代理公司: | 长沙永星专利商标事务所(普通合伙) 43001 | 代理人: | 周咏;林毓俊 |
地址: | 410013 湖*** | 国省代码: | 湖南;43 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 解脲脲 原体 蛋白 uur10_0288 及其 检测 方法 应用 | ||
本发明公开了一种解脲脲原体蛋白UUR10_0288蛋白及其检测方法与应用,其氨基酸序列如序列1所示。针对目前临床上解脲脲原体感染多通过分离培养法和分子生物学检测法进行,本发明通过检测解脲脲原体蛋白UUR10_0288蛋白特异性判断机体感染解脲脲原体。利用分光光度法在在血浆(清)中检测该蛋白,且该蛋白是一种谷胱甘肽过氧化物酶,可利用酶法分析法测定该酶或活性,此种方法较分离培养法和分子生物学法具有灵敏度高,酶特异性高,试剂安全无毒性,使用仪器设备简单,操作简便快速,可广泛用于检测解脲脲原体。
技术领域
本发明属于生物医学检测技术领域,具体涉及一种解脲脲原体蛋白UUR10_0288蛋白及其检测方法与应用。
背景技术
解脲脲原体(Ureaplasmaurealyticum,Uu)是能在体外培养的最小的原核细胞型微生物之一。Uu是人类泌尿生殖道一种常见的病原体,可引起尿道炎、前列腺炎、风湿性关节炎和盆腔炎等疾病。目前解脲脲原体病原学检查方法主要有分离培养及PCR检测。其中分离培养法有液体培养法和固体培养法,分离培养法检测Uu虽然方法简单且是检测解脲脲原体金标准,但费时且可因标本取材量不足,送检时间不及时,保存条件不当,取材前是否使用抗生素等因素影响而造成假阴性结果。PCR法检测灵敏度高,特异性强,但技术水平要求高,仪器水平要求高,不适宜基层使用且结果易出现假阳性,只可用于感染的辅助诊断及药物治疗的疗效监控,不能单独作为确诊或排除病例的依据。目前根据有关解脲脲原体的生物化学检测方法较少,可通过检测具有特异性的解脲脲原体蛋白从而诊断解脲脲原体感染。
UUR10_0288蛋白为解脲脲原体中的一种蛋白质,是一种新的谷胱甘肽过氧化物酶,分子量为19kDa,初步预测其酶活性由Cyst介导,能降解H2O2和有机氢过氧化物。谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)属于一种氧化应激酶,作为生物体内一类重要的抗氧化酶,可与过氧化氢酶竞争性催化H2O2,并能够清除机体内的有机氢过氧化物,保护机体组织细胞免受过氧化损伤。
谷胱甘肽过氧化物酶是机体内广泛存在的一种重要的过氧化物分解酶。GSH-Px的活性中心是硒半胱氨酸,其活力大小可以反映机体硒水平。硒是GSH-Px酶系的组成成分,它能催化GSH变为GSSH,使有毒的过氧化物还原成无毒的羟基化合物,从而保护细胞膜的结构及功能不受过氧化物的干扰及损害。当机体发生解脲脲原体感染时,UUR10_0288蛋白水平升高,可利用分光光度法检测UUR10_0288蛋白,因此我们可以通过UUR10_0288蛋白的浓度水平判断是否存在解脲脲原体感染。
发明内容
本发明目的是提供一种解脲脲原体蛋白UUR10_0288蛋白及其检测方法与应用,解决解脲脲原体检测方法复杂的问题。
本发明这种解脲脲原体蛋白UUR10_0288蛋白,其序列如序列1所示,具体为:
MKLSDYPVLDIDKKLFDWSKIKNKLVLIVNVASKCGYAKQYEQLEYLYQKYKNKGFVIIAFPCRQFMFQEFDDNNKIKEFCTTKYNVSFPIMYLTNVIGSNISPLYKQLITEYPWSPKAKAVKWNFEKFFVKNDEVIGRFESKCEPNDLEEFIKNNL。
本发明这种检测解脲脲原体蛋白UUR10_0288蛋白的方法,包括以下步骤:
1)取待测抗凝全血制备待测血清;
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